Nefrotoksinlerin Zebra Balığı Embriyosuna İntravenöz Mikroenjeksiyonu: Nefrotoksik Ajanları Zebra Balığı Embriyosunun Kan Dolaşımına Verme Tekniği

İntravenöz mikroenjeksiyon, ilgilenilen moleküllerin bir alıcı hayvanın kan dolaşımına verilmesini kolaylaştırır. Nefrotoksinleri bir zebra balığı embriyosuna vermek için, önce istenen nefrotoksin çözeltisinin uygun bir konsantrasyonunu hazırlayın.

İnce bir jel yükleme ucu kullanarak, bu nefrotoksin solüsyonunu keskin köşeli uçlu bir mikroenjeksiyon iğnesine yükleyin. Nefrotoksin çözeltisinin iğne ucunu yerçekimi ile doldurmasına izin vermek için iğneyi dikey olarak askıya alın. Şimdi, yüklenen mikroenjeksiyon iğnesini bir mikromanipülatörün tutucusuna sabitleyin.

Daha sonra, uyuşturulmuş bir zebra balığı embriyosunu prefabrike mikroenjeksiyon kalıbına aktarın. Kalıptaki embriyoyu, başı kuyu içinde ve kuyruğu kuyudan dışarı bakacak şekilde hizalayın, böylece mikroenjeksiyon için kuyruğa erişilebilirliği artırın. Ardından, iğne ucunu tam olarak embriyonun yanına yerleştirin.

Nefrotoksin çözeltisini embriyonun kuyruk damarına enjekte edin. Enjekte edilen nefrotoksik ajanlar dolaşım yoluyla yayılır ve böbrek gibi uzak organlara ulaşır. İğneyi yavaşça geri çekin. Embriyoyu, embriyo ortamı içeren taze bir tabağa aktarın ve iyileşmesine izin verin. Embriyoyu belirli bir süre inkübe edin.