Fare Glomerüllerinden Sıvı Aspirasyonu: İki Foton Aracılı Mikropunktur Kullanarak Fareden Glomerüler Sıvıyı Aspire Etme Yöntemi

Böbrekte, glomerulus - Bowman'ın kapsülünün içine yerleştirilmiş küçük kan damarlarından oluşan bir demet - kan filtrasyonunu başlatır ve atık sıvıyı çevredeki Bowman'ın alanına atar. Glomerüler sıvı içeriğinin araştırılması böbrek fizyolojisinin anlaşılmasına yardımcı olur.

Glomerüler sıvıyı aspire etmek için, böbreği cerrahi olarak dışlanmış anestezi uygulanmış bir fare hazırlayın. Şimdi, farenin göz yörüngesinin arkasındaki kan damarlarına floresan-dekstran boya enjekte edin. Floresan-dekstran molekülleri kan dolaşımında hareket eder ve böbreğe ulaşır.

Dekstranın yüksek moleküler ağırlığı nedeniyle, floresan boya glomerulus içinde tutulur ve ona yeşil bir renk verir. Derin oturmuş yapıların görüntülenmesine izin veren iki fotonlu bir mikroskop altında, glomerüler sıvıya yeterli erişim sağlamak için uygun bir glomerulus bulun.

Ardından, kırmızı floresan nanopartikül kaplı bir mikropipet ucunu böbreğin yanal ekseni ile hizalayın. Bir mikromanipülatör kullanarak, pipet ucunu böbreğe nüfuz edecek şekilde ilerletin. Uç hedef glomerulusa ulaştığında, glomerüler sıvıyı Bowman'ın boşluğundan aspire etmek için istenen aspirasyon hızını ayarlayın.

Kırmızı pipet ucunun içinde yeşil floresa