Farede İntraserebroventriküler Enjeksiyon: Fare Beyninin Serebral Ventriküllerine İlaç Vermek İçin Ommaya Aracılı Doğrudan İlaç Uygulama Yöntemi

Leptomeningeal hastalıkta, diğer vücut organlarından gelen kanser hücreleri, beyni çevreleyen ince doku tabakaları olan leptomeninges içinde bulunan beyin omurilik sıvısına veya BOS'a metastaz yapar.

İntraserebroventriküler enjeksiyon, kan-beyin bariyerinden kaçarak BOS'ta doğrudan ilaç uygulamasını kolaylaştırır.

Başlamak için, yüzüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir fare hazırlayın.

Kafatasını ortaya çıkarmak için kafayı kesin. Koronal ve sagital sütürlerin birleşme noktası olan bregmayı bulun.

Bir mikro matkap kullanarak, yoğun bağ dokusunun en dıştaki meningeal tabakasına - dura mater'e erişmek için kafatasında bregmadan uygun bir mesafede bir delik açın.

Ardından, küçük bir enjeksiyon portu olan ommaya'yı yavaşça deliğe sokun.

Yapıldıktan sonra, çevredeki cildi dikin ve ommayanın optimum süre boyunca yapışmasına izin verin.

Daha sonra, istenen ilaç süspansiyonu ile doldurulmuş şırıngayı ommaya'ya bağlayın.

Uygun bir akış hızı ayarladıktan sonra, ilaç süspansiyonunu dura mater içine enjekte edin.

Ommaya, beynin serebral ventriküllerindeki BOS'a doğrudan ilaç verilmesi için steril bir yol sağlar.

Şimdi, şırıngayı çıkarın ve ommayayı sonraki dozaj için kafatasında sağlam bırakın.

Farenin iyileşmesine izin verin.

Zamanla, ilaç molekülleri kanser bölgesine doğru göç eder ve kanser hücrelerinin büyümesini ve çoğalmasını önler.

Murine Ommaya enjeksiyon cihazını 25G minyatür enjeksiyon portu ve 1 milimetre ara disk kullanarak monte edin.

Metal kanülün yaklaşık 2,5 milimetrelik kısmının sağ serebral hemisfere nüfuz etmesini sağlamak için siyanoakrilat steril yapıştırıcı kullanın ve cildi steril tekniğe göre hazırlayın.

Küçük bir cilt kesisi yapın, ardından kafatasını ortaya çıkarmak için alttaki deri altı dokuların künt diseksiyonunu yapın. Hidrojen peroksit ile ıslatılmış pamuk uçlu aplikatör çubukları kullanarak kafatasını kurulayın.

Dura mater'i ortaya çıkarmak için kafatasında 0,9 milimetre, bregmanın 0,5 milimetre arka ve 1,1 milimetre yanal kısmında bir çapak deliği açın.

Mikro matkabı bir kenara çekin ve çapak deliğini hemen çevreleyen kemiği nazikçe çizin. Siyanoakrilat steril bir yapıştırıcı kullanarak kafatasına bir enjeksiyon portu yapıştırın ve yaklaşık 2,5 milimetre derinliğe yerleştirin.

4-0 emilmeyen naylon sütürler kullanarak kesiği kesik şeklinde dikin veya çanta ipi sütür. Ameliyat sonrası fareleri iyileşme için ayrı kafeslerde barındırın.

Fareyi dozlamak için, bir port enjeksiyon adaptörü ve bir Hamilton şırınga kullanarak Murine Ommaya'ya erişin. Forseps kullanarak, minyatür enjeksiyon portunun üst kısmını tutun ve port enjektör adaptörünü yavaşça portun septumuna tam olarak yerleştirin.

Enjeksiyon yapıldıktan sonra, Murine Ommaya'yı forseps ile port enjeksiyon adaptöründen çıkarın.