Hücresel Biyolüminesans Tabanlı Test: Kombinatoryal İlaç Taraması için Yüksek Verimli Bir Yöntem

Hücresel biyolüminesans, anti-kanser ilaçlarının büyük ölçekli taraması için oldukça hassas ve hızlı bir yaklaşımdır.

Bu teknik, ışık üreten bir kimyasal reaksiyonu katalize eden ve konakçı hücrelerin karanlıkta parlamasına neden olan bir enzim olan lusiferazı ifade eden tümör hücrelerini kullanır. Yayılan lüminesansın yoğunluğu, canlı hücre yoğunluğu ile doğru orantılıdır.

Başlamak için, lusiferaz eksprese eden hücreleri, hücre dışı bir matris veya ECM ile kaplanmış optik olarak berrak bir kültür plakasında tohumlayın ve inkübe edin.

İnkübasyon sırasında ECM, hücrelerin kültüre iyi bağlanmasını teşvik eder.

Daha sonra, ilaç kombinasyonunun konsantre stoklarını alın ve ilaç karışımının seri seyreltmesini hazırlamak için farklı hacimlerde kültür ortamı ekleyin.

Şimdi, kültür ortamını yapışan hücrelerden çıkarın. İlaç kombinasyonunun farklı seyreltmelerini ekleyin ve inkübe edin.

İnkübasyon sırasında, ilaç kombinasyonu hücresel hedefler üzerinde sinerjik olarak hareket eder.

Şimdi, ilaç içeren ortamı çıkarın ve lusiferin içeren taze ortamı ekleyin.

Luciferin zar boyunca yayılır ve hücrelere girer. Hücreler tarafından eksprese edilen lusiferazlar, lusiferini oksitlemek ve ışık sinyall