JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:37 dk. • April 30th, 2023
Fare beyin örneğini hızlı dondurma yoluyla dondurarak saklamak için, oldukça iletken bir sıvı olan izopentan çözeltisi ile doldurulmuş bir beher alarak başlayın ve sıvı nitrojen içeren bir kavanoza daldırın.
Çözelti viskoz hale gelene kadar izopentanı dondurun.
Bu arada, sakaroz çözeltisine önceden eklenmiş bir fare beyin örneği alın. Bu tedavi sonraki aşamalarda beyin dokusu deformasyonunu önler.
Beyin örneğini sakaroz çözeltisinden çıkarın ve sükroz izlerini gidermek için kurulayın.
Ardından, beyni istenen yönde bir gömme ortamı tabakası içeren derin bir kriyokalıba yerleştirin.
Tüm organın kaplandığından emin olmak için beyni kriyo kalıbın içine daha fazla gömme ortamı ile kaplayın.
Ardından, gömülü beyni içeren kriyokalıbı önceden soğutulmuş izopentan banyosuna daldırın. Beyin dokusunun ultra düşük bir sıcaklığa hızlı bir şekilde soğutulması, beyin mimarisinin herhangi bir bozulma olmadan korunmasını sağlar.
Şimdi, beyin örneğinin, gömme ortamı katılaşana ve beynin etrafında jelatinimsi bir tabaka oluşturacak şekilde katılaşana kadar donmasına izin verin ve onu yerinde tutun.
Dondurulduktan sonra, kriyokalıbı izopentan banyosundan çıkarın ve dondurularak saklanmış fare beynini
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin