Murin Beyninin Çırpıda Dondurma ile Dondurularak Saklanması: Histolojik Analiz için Tüm Fare Beyni Örneğini Hızla Dondurma Tekniği

0 görüntüleme2:37 dk • April 30th, 2023

Fare beyin örneğini hızlı dondurma yoluyla dondurarak saklamak için, oldukça iletken bir sıvı olan izopentan çözeltisi ile doldurulmuş bir beher alarak başlayın ve sıvı nitrojen içeren bir kavanoza daldırın.

Çözelti viskoz hale gelene kadar izopentanı dondurun.

Bu arada, sakaroz çözeltisine önceden eklenmiş bir fare beyin örneği alın. Bu tedavi sonraki aşamalarda beyin dokusu deformasyonunu önler.

Beyin örneğini sakaroz çözeltisinden çıkarın ve sükroz izlerini gidermek için kurulayın.

Ardından, beyni istenen yönde bir gömme ortamı tabakası içeren derin bir kriyokalıba yerleştirin.

Tüm organın kaplandığından emin olmak için beyni kriyo kalıbın içine daha fazla gömme ortamı ile kaplayın.

Ardından, gömülü beyni içeren kriyokalıbı önceden soğutulmuş izopentan banyosuna daldırın. Beyin dokusunun ultra düşük bir sıcaklığa hızlı bir şekilde soğutulması, beyin mimarisinin herhangi bir bozulma olmadan korunmasını sağlar.

Şimdi, beyin örneğinin, gömme ortamı katılaşana ve beynin etrafında jelatinimsi bir tabaka oluşturacak şekilde katılaşana kadar donmasına izin verin ve onu yerinde tutun.

Dondurulduktan sonra, kriyokalıbı izopentan banyosundan çıkarın ve dondurularak saklanmış fare beynini bir folyo tabakaya sarın.

Daha fazla histolojik analiz için numuneyi eksi seksen santigrat derecede saklayın.

Kriyoprezervasyona hazırlanmak için bir kavanozu soğuk izopentan/2-metilbütan ile doldurun ve kavanozu sıvı nitrojenle dolu bir kaba koyun. Çözücü soğurken, beyni bir parça filtre kağıdına kurulayın ve beyni etiketli bir kriyokalıba yerleştirin.

Kriyo kalıbın merkezine dikkatlice yaklaşık 5 mililitre optimum sıcaklıkta kesme ortamı ekleyin ve beyni istenen yönde kalıba yerleştirin. Temiz forseps kullanarak, kriyokalıbı 30 ila 40 saniye boyunca soğutulmuş izopentan/2-metilbütan içine hızlı bir şekilde yerleştirin.

Kesme ortamı katılaştıktan sonra, kriyokalıbı kuru buza aktarın ve eksi 80 santigrat derece saklama için kriyokalıbı ve donmuş beyin dokusunu alüminyum folyoya sarın.

09:13

Yüksek zenginleştirilmiş Nöronal Kültürlerin Üretimi için Kortikal Doku Blokları, Kriyoprezervasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:37

Birden çok kemirgen beyin aynı anda Cryosectioning

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:06

Downstream Analizleri için Dondurulmuş Kemirgen Beyin Bölgeleri Koleksiyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

28:32

Flaş Dondurma ve E12.5 Fare Beyin Cryosectioning

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:30

Kesit için kas dokusunun hızlı dondurulması: hızla donmuş murin kas dokusunun ultra ince kesitlerini elde etmek için bir protokol

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:37

Donmuş Fare Beyin Dokusu Kesiti: Donmuş Murin Beyin Dokusundan İnce Donmuş Doku Kesitleri Elde Etme Prosedürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:44

Aşağı akış analizi için bir fare beyninin işlenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:19

Fare Beyin Dokusunun Donarak Kırılmış Bir Örneğinde Nöronal Membran Proteinlerinin İmmünoetiketlenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:27

Pasif X kromozom üzerinde Mecp2 farmakolojik yeniden aktivasyonu için rasgele olmayan bir fare modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:36

Multipleks Floresan In Situ Hibridizasyonun Floresan İmmünohistokimya ile Taze Dondurulmuş veya Sabit Fare Beyin Kesitlerinde Birleştirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 29 Ağustos 2026