JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:37 dk. • April 30th, 2023
Bir fare beyninin kriyoseksiyonlarını veya ince donmuş doku bölümlerini elde etmek için, önce uygun bir gömme ortamına gömülü donmuş bir fare beyni bloğu alın.
Donmuş bloğu bir kriyostat odasına aktarın ve sonraki kesit alma prosedürü için bloğun sıcaklığının kriyostatın ayarlanan sıcaklığı ile dengelenmesine izin verin.
Ardından, donmuş doku bloğunu kriyostat numune diskinin tabanına monte etmek için gömme ortamı kullanın.
Numune diskini kriyostatın numune kafasına yerleştirin.
Ek olarak, kriyostatın bıçak tutucusuna bir bıçak sabitleyin.
Harici el çarkını kullanarak, doku bloğunu bıçakla hizalamak için numune kafasının konumunu ayarlayın.
Doku bloğu ve bıçak doğru bir şekilde yönlendirildikten sonra, doku bloğunun fazla gömme ortamı içeren istenmeyen bölgesini keserek kesiti başlatmak için el çarkını hareket ettirin.
Donmuş doku bloğu sabit bıçağa doğru ilerlerken istenilen kalınlıkta dilimler halinde kesilir.
Dilimlenmiş donmuş doku bölümlerini dikkatlice pozitif yüklü cam slaytlara aktarın. Yüklü cam kızaklar, donmuş doku bölümlerini elektrostatik olarak çekerek slayt yüzeyine yapışmalarını kolaylaştırır.
Son olarak, daha fazla analize kadar bölümleri düşük sıcaklıklarda saklay
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin