Dondurularak Saklanmış Doku Kesiti Fiksasyonu ve Boyama: Lazer Mikrodiseksiyon için Donmuş Beyin Dokusu Kesitlerini İşleme Prosedürü

Heterojen bir fare beyin tümörü dokusundaki spesifik hücre popülasyonlarını daha sonraki izolasyonları için ayırt etmek için, ilgilenilen dondurularak saklanmış beyin tümörü dokusu bölümünü taşıyan bir cam slayt alarak başlayın.

Dokuyu azalan etanol konsantrasyonlarında sırayla inkübe edin. Etanol, dokuya nüfuz eden gömme ortamını çözer ve nükleik asit bütünlüğünü korurken dokuyu sabitler.

Ek olarak, etanol dokuyu yeniden sulandırır ve sonraki adımlarda eşit lekelenmeyi sağlar.

Şimdi, dokuyu Cresil menekşe ile tedavi edin. Kresil menekşe - bazik bir boya - nükleik asitler gibi asidik hücresel bileşenleri lekeler.

Daha sonra, dokuyu Eosin Y ile karşı boyayın Eozin Y - asidik bir boya - sitoplazmik proteinler gibi temel hücresel bileşenleri boyar.

Bu diferansiyel boyama adımı, sitoplazma ve diğer hücresel yapılar arasında ayrım yapmaya yardımcı olarak ilgilenilen hücrelerin tanımlanmasını sağlar.

Boyama sonrası, dokuyu kurutmak ve aşırı doku bozulmasını önlemek için dokuyu artan etanol konsantrasyonlarına daldırın.

Sonra, dokuyu ksilen ile yıkayın. Ksilen, etanolü doku bölümünden uzaklaştırır ve uzaklaştırır.

Son olarak, doku morfolojisini korumak için doku bölümüne uygun bir montaj