JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:05 dk. • April 30th, 2023
Katı tümörler tarafından salınan bazı kimyasal cezbedici maddelere yanıt olarak, tümörle ilişkili makrofajlar veya TAM'lar gibi bağışıklık hücreleri katı tümörlere sızar. Daha sonra, bu TAM'lar tümör ilerlemesini kolaylaştırır.
TAM'lar ve tümör hücreleri arasındaki etkileşimleri in vitro olarak incelemek için, membranöz bir ek ile çok kuyulu bir plaka alarak başlayın. Bu düzenleme, kuyuyu geçici olarak iki bölmeye ayırır.
Daha sonra, transwell'in üst bölmesine bir TAM süspansiyonu ekleyin.
Transwell'in alt bölmesini, tümör hücreleri tarafından salgılanan kimyasal cezbedici maddelerle zenginleştirilmiş şartlandırılmış bir ortamla destekleyin.
Plakayı istenen süre boyunca inkübe edin.
İnkübasyon sırasında, kimyasal modülatörler TAM'leri çeker. Bu, TAM'lerin kimyasal kaynaklı kemotaksis yoluyla gözenekli ek membran yoluyla alt bölmeye hareketine yol açar.
Şimdi, eki kuyudan çıkarın. Göçmen TAM popülasyonunu içeren şartlandırılmış ortamı floresan ölçümü için uygun bir plakaya aktarın.
Hücrelere floresan boya içeren bir lizis tamponu uygulayın. Bu tampon makrofajları parçalar. Sonunda, boya molekülleri nükleik asitlere bağlanarak gelişmiş bir floresan üretir.
Son olarak, bir floresan pl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin