JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:02 dk. • April 30th, 2023
Nörosferler, nöral öncü hücrelerin veya NPC'lerin yapışık olmayan küresel agregatlarıdır.
Spesifik yapışkan kültür koşulları altında kaplandığında, NPC'ler kendiliğinden nörosferden dışarı çıkabilir.
NPC'lerin göç tepkisini değerlendirmek için, önce uygun bir ortamda istenen yoğunlukta bir NPC süspansiyonu hazırlayın.
Daha sonra, hücre süspansiyonunu ortam içeren bir kültür plakasına tohumlayın ve inkübe edin.
Ortamdaki spesifik büyüme faktörleri hücrelerin çoğalmasını destekler. Ek olarak, bir kaplama substratının olmaması, hücreleri ortamda asılı tutar ve nöroküre adı verilen 3D hücre agregatları oluşturmalarını kolaylaştırır.
İstenilen boyuta ulaştığınızda, nörosferleri toplayın.
Seyreltilmiş ortamda nörosfer peletini santrifüjleyin ve yeniden süspanse edin.
Daha sonra, nörosfer süspansiyonunu seyreltilmiş ortam içeren hücre dışı matris kaplı bir plakaya yerleştirin ve inkübe edin.
Kültür sırasında, nörosferler hücre dışı matrise yapışır.
Zamanla, hücre dışı matrisin bileşenleri nedeniyle, birkaç NPC nörosfer çekirdeğinden uzaklaşmaya başlar.
Şimdi, ortamı çıkarın ve hücreleri sabitleyin.
Hücre göçü sergileyen nörosferlerin faz kontrastlı görüntülerini yakalayın.
Uygun yazılımı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin