JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 8:27 dk. • April 30th, 2023
Beyin endotel hücrelerini izole etmek için, önce hasat edilmiş bir sıçan beynini soğutulmuş tampon içeren bir tabağa aktarın.
Beyincik ve optik sinirleri çıkardıktan sonra beyni serebral hemisferlere bölün. Ardından, orta beyni ön beyinden ayırın.
Meninksleri ve miyelin içeren beyaz maddeyi ön beyinden çıkarın, mikrodamarları izole etmek için beyin korteksini geride bırakın.
Ardından, sinir dokusunu ve bileşenlerini kırmak için korteksi homojenize edin.
Hücresel kalıntıları ve miyelini gidermek için homojenatı santrifüjleyin.
Daha sonra, doku peletini kollajenaz, dispas ve deoksiribonükleaz enzimleri içeren bir sindirim kokteyli ile tedavi edin.
Kollajenazlar ve dispaslar, mikrodamarları gömen hücre dışı matrisi sindirir ve mikrodamar parçalarını dokudan gevşetir. Deoksiribonükleazlar, parçalanmış hücrelerden salınan herhangi bir serbest DNA'yı bozar.
İstenilen hacimde sindirilmiş homojenatı uygun yoğunluk gradyan ortamı ve santrifüj ile karıştırın.
Miyelin ve beyin parankimal hücre içeren en üst tabakayı ve ardından süpernatanı atın.
Şimdi, endotel hücreleri ve perisitleri içeren mikro damar parçalarını tamamen serbest bırakmak için mikro damar içeren peleti sindirim kokteyli ile
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin