JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 7:02 dk. • April 30th, 2023
Kan-beyin bariyeri veya BBB, kan ve beyin arasındaki maddelerin taşınmasını düzenleyen endotel hücrelerinin ve astrositler gibi beyin hücrelerinin seçici bir bariyeridir.
Bir BBB modeli geliştirmek için, bir kültür plakası kapağına bir membran ekini ters çevirin.
Zarın üzerine astrositler tohumlayın. Kültür plakasını ekin üzerine yerleştirin ve inkübe edin.
Bu, astrositleri zar ile kuyu yüzeyi arasında hapseder.
Astrositleri dibe getirmek için plakayı geri çevirin ve kuyuya uygun bir ortam ekleyin.
Ek parçaya, bariyer oluşumu için gerekli olan hücre-hücre temaslarını artıran optimal sıkı bağlantı proteinlerini ifade eden endotel hücreleri ekleyin.
Endotel hücrelerinin zara yapışmasına izin vermek için inkübe edin.
Harcanan ortamı çıkarın ve eki iyi içeren başka bir büyüme faktörü içermeyen astrosit ortamına aktarın.
Daha sonra, eke büyüme faktörü içermeyen bir endotel hücre ortamı ekleyin ve inkübe edin.
Büyüme faktörlerinin yokluğu hücre bölünmesini engeller, hücreden hücreye temasları korur ve bariyer özelliklerini stabilize eder.
Endotel hücreleri ve astrositler, BBB gibi sıkı bağlantılara sahip bir bazal membran oluşturmak için etkileşime girer.
Daha sonra, yeni bir kültür kuyu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin