JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:53 dk. • April 30th, 2023
Endotel hücreleri, perisitler ve astrositlerden oluşan kan-beyin bariyeri veya BBB, biyolojik moleküllerin akışını ve akışını düzenler ve beyin homeostazının korunmasına yardımcı olur.
BBB modelinin in vitro geçirgenliğini değerlendirmek için, gözenekli membran ekinin üst veya kan tarafında yapışık endotel hücrelerinden ve zarın bazal veya beyin tarafında yapışık astrositlerden oluşan bir in vitro BBB modeli ile başlayın.
Hücre dışı matriksleri ile endotel hücreleri, BBB taklidini oluşturan astrositlerle temas eder.
Optimum floresan ölçümü için istenen hacimde besiyerini kandan ve beyin tarafından siyah çok kuyulu bir plakaya aktarın.
Kültürün kan tarafındaki ortamı, küçük moleküler ağırlıklı floresan izleyici molekülleri içeren ortamla değiştirin.
Kültürde, endotelyal-astrosit hücre temasları, hücresel bariyeri arttırır ve sıkı bariyeri stabilize eder, izleyici moleküllerin kültürün beyin tarafına difüzyonunu sınırlar.
Ayrıca, istenen zaman noktalarında kan ve beyin tarafından uygun hacimlerde ortam toplayın. Ortam sesini korumak için her iki tarafı da ortamla değiştirin.
Son olarak, BBB modelinin geçirgenliğini değerlendirmek için toplanan ortamın floresansını ölçmek için çok kuy
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin