Zebra Balığı Larvalarından Beyin Hücresi İzolasyonu: Zebra Balığı Beyin Dokusundan Sağlam Nöronlar, Makrofajlar ve Mikroglia Elde Etme Tekniği

Zebra balığı beyni, bilginin işlenmesinde önemli bir rol oynayan sinir hücreleri olan nöronlardan oluşur. Ek olarak, nöronlar arası boşlukta yaşayan makrofajlar ve mikroglia dahil olmak üzere destekleyici bağışıklık hücrelerinin bir popülasyonunu içerir.

Tüm bu tür beyin hücrelerini bir zebra balığından izole etmek için, önce anestezi uygulanmış zebra balığı larvalarını uygun ortam içeren bir Petri kabına alın.

Zebra balığını stereomikroskop altında görselleştirin ve beyni sağlam tutmak için larva başlarını yumurta sarısı kesesinin üzerine geçirin.

Eksize edilen başlıkları, buz üzerine yerleştirilmiş, önceden soğutulmuş ortamla doldurulmuş bir homojenizatöre aktarın. Düşük sıcaklık, beyin hücrelerinin bozulmasını önlemeye yardımcı olur.

Bir havaneli ile zebra balığı beyin dokusunu homojenize edin. Homojenizasyon, hücre dışı matrisi parçalar ve nöronların, makrofajların ve mikrogliaların beyin dokusundan ayrışmasını başlatır.

Bu adım aynı zamanda lipit açısından zengin bir yalıtım tabakası olan miyelini nöronlardan ayırır.

Büyük hücre kümelerini hapsetmek için homojenatı bir süzgeçten geçirin.

Hücreleri ve miyelin kılıf parçalarını peletlemek için süzüntüyü santrifüjleyin. Kalıntı i