JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:07 dk. • July 8th, 2025
Damlacık dijital polimeraz zincir reaksiyonu veya dPCR teknolojisi, tek bir PCR reaksiyonunun reaktanları milyonlarca nanodamlacık PCR reaksiyonuna böler. Bu kütle bölünmesi ve ardından amplifikasyon, vahşi tip DNA'nın geniş bir arka planına karşı çok az miktarda mutant DNA'yı tespit ederek erken kanser tespitini mümkün kılar.
Başlamak için, diğer PCR reaktifleri ve bir damlacık stabilize edici yağ ile birlikte floresan etiketli oligonükleotidler içeren dPCR ana karışımını aspire edin. Hava kabarcıklarını önlemek için bu ana karışımı doğrudan bir PCR şerit tüpündeki her bir kuyucuğun dibine ekleyin. Ardından, reaksiyon karışımına DNA örnekleri ekleyin ve karıştırmak için birden çok kez pipetleyin.
Şimdi, tüm reaksiyon karışımını damlacık üreten bir cihazın özel bir çipine aktarın. Damlacık üreten cihaza yeni bir PCR şerit tüpü monte edin. Damlacık üreteci, damlacıklar arasında çapraz kontaminasyonu önleyen kapsüllenmiş bir alana sahip ayrı nanodamlacıklar oluşturmak için numuneyi ve yağı birleştirir.
Damlacıklama tamamlandıktan sonra, hedef DNA'yı amplifiye etmek için PCR şerit tüpünü bir termal döngüleyiciye aktarın. Ardından, PCR ürününü, floresan pozitif ve negatif damlacıkları
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin