JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:39 dk. • July 8th, 2025
İn vivo beyin kanseri görüntülemesi, tümör gelişimini gözlemlemek için floresan etiketli kanser hücrelerinin fare beynine enjekte edilmesini içerir. Floresan etiketleme için, glioma hücrelerini lentivirüs parçacıkları ile inkübe edin. Lentiviral vektör, kızılötesi floresan proteini, iRFP genini taşır.
Virüs, glioma hücre yüzeyine bağlanır ve RNA'yı hücreye bırakır. Hücresel enzimler, viral RNA'yı, hücresel genoma entegre olan ve iRFP ekspresyonuna izin veren çift sarmallı DNA'ya dönüştürür. iRFP'nin uyarılma ve emisyon maksimumları, dokuların minimum emilim ve saçılmaya sahip olduğu yakın kızılötesi bir bölgede yer alır. Bu, doğru derin doku görüntülemesine izin verir.
Ardından, harcanan ortamı çıkarın ve tripsin ekleyin. Bir proteaz enzimi olan tripsin, yapışma proteinlerini sindirerek hücreleri şişe yüzeyinden ayırır. Tek tek hücreleri ayırmak için tekrar tekrar pipetleyin. Hücre süspansiyonunu bir tüpe toplayın ve santrifüjleyin. Şimdi, peleti yeniden süspanse etmek için uygun bir tampon ekleyin.
Hücre süspansiyonunu akış sitometri tüplerine dağıtın ve hücreleri bir floresan boya olan DAPI ile boyayın. DAPI, ölü hücrelerin çekirdeğini parlak maviye boyar ve onları canlı hücreler
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin