JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:21 dk. • July 8th, 2025
Merkezi sinir sisteminde perisitler, kılcal damarların iç hücresel astarını oluşturan endotel hücrelerini saran çok işlevli hücrelerdir. Perisitler kan akışını düzenlemeye ve beyin homeostazını korumaya yardımcı olur.
Perisitleri izole etmek için, donmuş sığır beyin kılcal damarlarını bir şişede alarak başlayın. Çözüldükten sonra, içeriği istenen ortamı içeren bir tüpe aktarın. Kılcal damarları peletlemek için santrifüjleyin. Dondurucu ortam içeren süpernatanı çıkarın. Kılcal peleti ortamdaki yeniden süspanse edin ve süspansiyonu hücre dışı matris proteini kaplı bir şişeye tohumlayın.
Kılcal damarların şişedeki kaplamaya yapışmasını sağlamak için inkübe edin. Ortamı heparin içeren ortamla değiştirin. Kültürde, hücre dışı matriks protein kaplaması, perisitlerin kılcal damar parçalarından uzaklaşmasını ve çoğalmasını teşvik ederken, heparin endotel hücre göçünü uyarır.
Harcanan ortamı heparin içeren ortamla değiştirin. Zamanla, perisitler şişeye güçlü bir şekilde yapışan uzun süreçler yansıtır. Sınırlı substrat alanı ile endotel hücreleri çoğalır ve teması inhibe edilmiş bir tek tabaka oluşturur. Uygun perisit yoğunluğuna ulaştıktan sonra, ortamı çıkarın ve şişeyi tamponla yıkayın.
G
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin