Serebral Kılcal Damarların İnsan Beyninden İzolasyonu: İnsan Beyin Dokusundan Serebral Kılcal Damarları Çıkarmak İçin Optimize Edilmiş Bir Yöntem
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 6:28 dk. • July 8th, 2025
Serebral kılcal damarlar, kan-beyin bariyerinin hayati bir bileşenidir - çözünen maddelerin kan ve beyin arasında seçici hareketine izin veren yarı geçirgen bir bariyer. Serebral kılcal damarları izole etmek için taze insan beyin dokusu ile başlayın. Meninksleri çıkarın ve beyaz maddeyi doğrayın.
Beyin dokusunu daha küçük parçalara ayırın. Parçaları uygun bir tampon içeren bir homojenizatöre aktarın ve homojenize edin. Homojenizasyon, dokuları parçalayarak kılcal damarları ve doku kalıntılarını çözeltiye bırakır.
Homojenatı yeni bir tüpe aktarın ve optimum hacimde uygun yoğunluk gradyan ortamı ekleyin. Kılcal damarları peletlemek için çözeltiyi santrifüjleyin. Çok fazla veya çok az yoğunluk gradyan ortamı, düşük kılcal verime neden olur. Süpernatanı çıkarın.
Peletleri sığır serum albümini veya BSA takviyeli tampon içinde yeniden süspanse edin. BSA, sindirim enzimlerini stabilize eder ve kılcal damarların yapısal bütünlüğünü korur. Ardından, büyük damarları ve doku kalıntılarını gidermek için çözeltiyi uygun bir filtre ile filtreleyin.
Ardından, süzüntüyü daha küçük bir ağ filtreden geçirin. Bu filtre, serebral kılcal damarları tutar ve daha küçük döküntülerin ve kırmızı kan hücrele
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin