JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:37 dk. • July 8th, 2025
Memelilerde, ağzın çatısı olan damak, sert damak ve yumuşak damak olmak üzere iki kısma ayrılır. Damağın arka kas kısmı olan yumuşak damak, damağın ön kemikli kısmı olan sert damak ile süreklilik gösterir. Damak dokusunu toplamak için, sırtüstü pozisyonda ötenazi yapılmış bir fare ile başlayın. Ardından, hayvanın ağzının etrafındaki alanı tıraş edin.
Şimdi, farenin her iki tarafında yanaktan çeneye doğru cerrahi kesiler yapın. Ağzını geniş açın ve damak bölgesini sterilize edin. Ayrıca, maksiller diş arkının iki tarafı arasında damak tarafı boyunca marjinal bir kesi yapın.
Sert damak mukoperiosteumunun bir kısmını dikkatlice kaldırın - mukoza zarının yoğun fibröz bağ dokusu olan periost ile birleşmesiyle oluşan sert damağın kemiklerini kaplayan bağ dokusu. Bu adım, sert damağın alttaki kemikli yapılardan ayrılmasını kolaylaştırır ve yumuşak damağı ağız boşluğundan daha fazla serbest bırakır.
Doku içinde bakteri ve mantar kontaminasyonunu önlemek için hasat edilen damağı hemen antibiyotik ve antimikotiklerle desteklenmiş uygun besiyeri içeren bir tüpe aktarın. Daha sonraki işlemlere kadar dokuyu daha düşük sıcaklıklarda saklayın.
Yetişkin bir C57BL/6J fareyi kurban ettikten sonra, ağız çevresindeki tüyleri bir tıraş makinesiyle alın ve makas kullanarak yanaklardan çeneye doğru her iki taraftan kesin. Ardından, ağzı geniş açmak ve pamuklu çubuk kullanarak kanı emmek için forseps kullanın. Daha sonra %10 povidon-iyot içeren bir pamuklu çubukla ağız içini silerek damağı dezenfekte edin.
Fare damağını hasat etmek için, önce cerrahi bir neşter bıçağı kullanarak, maksiller dişlerin damak tarafı boyunca tam kalınlıkta marjinal bir kesi yapın. Ardından, bir raspatorium kullanarak, tüm damağı dikkatlice inceleyin. Damak dokusunu, antibiyotik ve antimikotiklerle takviye edilmiş 4 mililitre tam ortam içeren 15 milimetrelik bir tüpe hızlı bir şekilde aktarın.