Miyokard Enfarktüsünün Murin Modelinin Oluşturulması: Fare Modelinde Sol Ön İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu İçin Cerrahi Bir İşlem

Başlamak için, sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir fare hazırlayın. Boynunda uzunlamasına bir kesi yapın ve tükürük bezlerini yerinden çıkarın. Ardından, alttaki trakeayı ortaya çıkarmak için kayış kaslarını çevreleyen bir bağ dokusu tabakası olan fasyayı ayırın.

Ağızdan bir entübasyon kanülü yerleştirin ve insizyon yoluyla doğru trakeal yerleştirildiğini onaylayın. Kanülü, fareye yeterli havalandırma sağlayan istenen parametrelere ayarlanmış ventilatöre bağlayın.

Şimdi, fareyi sağ lateral dekübit konumuna getirin. Sol pektoralis kasları arasındaki cildi kesin ve fasyayı ayırın. Ventilatörü pozitif ekspirasyon sonu basıncına veya PEEP ayarına değiştirin.

Üçüncü interkostal boşlukta sol taraflı bir torakotomi yapın - üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasında yapılan bir kesi. PEEP modu sırasında hava yollarındaki pozitif basınç, torakotomi sırasında alveolar kollapsı önler.

Kalbe eriştikten sonra perikardımı çıkarın. Sol ön inen veya LAD koroner arteri tanımlayın - sol koroner arterden ayrılan parlak kırmızı bir damar. LAD arter, sol ventrikülün büyük bir kısmına kan sağlar.

Cerrahi olarak LAD arterini proksimalde sol kulakçıklara bağlayın. LAD arterinin bu ligasyonu ventrikülün soluklaşmasına neden olur. Kesi kapatın. Hayvanı kafesine geri koyun. Kalıcı LAD arter ligasyonu, kalp kaslarına giden kan akışını ve oksijen beslemesini engelleyerek kasların hasar görmesine ve ölümüne neden olur.

Anestezi uygulanmış 25 ila 30 gramlık bir erkek C57BL/6 fareyi boğazda ve göğüs kafesinin sol tarafında hızlı bir şekilde tıraş etmek için elektrikli tıraş bıçağı kullanın. Ayak parmağınızı sıkıştırmaya yanıt verilmediğini onaylayın. Hayvanın gözlerine merhem sürün. Fareyi bir ısıtma yastığının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve gözlerin aşırı ısınmasını önlemek için başın altına küçük bir gazlı bez kompresi yerleştirin.

Uzuvları yapışkan bantla sabitleyin. Üst kesici dişlerin altından 5-0 ipek sütürlü bir halka geçirin ve kanülasyon sırasında ağzı açık tutmak için ilmeğin ucunu ısıtma yastığının üzerine sabitleyin. Tıraş edilmiş bölgelere tüy dökücü krem sürün ve pamuklu çubukla 1 dakika boyunca nazikçe masaj yapın.

Fazla kürkü ve kremayı gazlı bezle çıkarın ve açıkta kalan cildi% 0.9 tuzlu su çözeltisi ve gazlı bez damlalarıyla temizleyin. Traş edilmiş boğaz ve göğüs kafesine steril gazlı bez parçaları uygulayın ve gazlı bezi iyodopovidon ile ıslatın. Ventilatörü kilogram başına 7 mililitre tidal hacme ve dakikada 140 strokluk bir ventilasyon hızına ayarlayın.

Fareyi mikrocerrahi stereomikroskop altında hareket ettirin. Cildi boğazın merkezinde tutarak, kaudal / sefalik çizgi boyunca 0,5 santimetrelik bir kesi yapın ve tükürük bezinin loblarını ayırın. Gırtlak ve trakea görünene kadar sternohyoid kasın fasyasını nazikçe ayırmak için kavisli forseps kullanın. Ardından, açıklığın kenarlarını elastik bantlara bağlı ekartörlerle sabitleyin.

Ardından, dili yavaşça yana doğru çekin ve 16 gauge kanülün körelmiş iç iğnesini trakeaya sokmak için forseps kullanın. Boğaz kesisinden trakeaya doğru bir şekilde yerleştirildiğini görselleştirin ve kanülü ventilatöre bağlayın. Operasyon sırasında dokuları ıslak tutmak için insizyon üzerine iyodopovidon ile ıslatılmış gazlı bez takviye edilmiş steril% 0.9 salin yerleştirin.

Ardından egzoz borusunu suya yerleştirin. Kabarcıkların varlığı başarılı bir entübasyona işaret eder. Sol ön inen koroner arter veya LAD'nin bağlanması için, fareyi dikkatlice sağ taraf dekübit pozisyonuna getirin ve sol ön ekstremiteyi yeni pozisyonda yeniden sabitleyin.

Sol pektoralis minör ve majör kaslar arasındaki çizgiyi belirleyin ve çizgi boyunca 1 santimetrelik eğik bir cilt kesisi yapın. Künt diseksiyon mikro makası kullanarak, pektoralis kaslarının fasyasını dokuları kesmeden ayırın ve ayrılmayı korumak için elastik bantlara bağlı ekartörler kullanın.

Ventilatörü 3 santimetre su pozitif ekspirasyon sonu basıncına ayarlayın. Üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasındaki üçüncü interkostal boşlukta göğüs boşluğunu açmak için künt forseps kullanın. Göğüs kafesine, her bir kaburgaya bir tane olmak üzere iki ekartör yerleştirin ve kalbe ve akciğerlere zarar vermeden perikardımı dikkatlice çıkarmak için kavisli ince bir forseps kullanın.

LAD'yi sol kulak kepçesinin kenarından apekse doğru uzanan yüzeysel parlak kırmızı bir çizgi olarak bulun. Sol kulakçık yerinin 2 ila 3 milimetre altında, LAD'ın altından 7-0 ipek sütür geçirmek için bir iğne tutucu kullanın. Kalp dokusunun yırtılmasını önlemek için ipeği yavaşça çekerek, bağı üç düğümle bağlayın. Sol ventrikülün sol alt kısmı, ligasyon üzerine anında soluklaşacaktır.

Şimdi, kaburga ekartörlerini serbest bırakın ve üçüncü kaburgayı forseps ile tutarak, üçüncü ve dördüncü kaburgaların altındaki 6-0 ipek sütür ile iki geçiş yapın. Açıklığa üç damla 37 santigrat derece,% 0.9 tuzlu su çözeltisi koyun ve akciğerleri düzgün bir şekilde şişirmek için son kullanma egzoz borusunu 2 veya 3 solunum döngüsü boyunca kapatın.

Sütürü iki atışla sıkın ve sabitleyin ve kasları tutan ekartörleri serbest bırakarak kasların doğru anatomik konumlarına dönmesine yardımcı olun. Daha sonra göğüs derisini iki dikiş ve iki adet 5-0 dikiş ipeği ile kapatın. Boğaz derisini bir dikiş, 5-0 dikiş, ipek ve iki atışla kapatın.