Eforlu Sıcak Çarpması Fare Modeli: Eforlu Sıcak Çarpmasının Altında Yatan Mekanizmaları İncelemek İçin Bir Protokol

Eforlu sıcak çarpması veya EHS, sıcak ve nemli koşullarda fiziksel aşırı efor nedeniyle vücut sıcaklığındaki hızlı bir artıştan kaynaklanır ve nörolojik işlev bozukluğuna ve çoklu organ hasarına yol açar.

EHS için klinik öncesi bir model oluşturmak için, çekirdek vücut sıcaklığının sürekli izlenmesine izin veren bir radyotelemetri cihazı implante edilmiş bir fareyi ele alalım. Fareyi, zorunlu bir koşu tekerleği ve bir sıcaklık izleme cihazı ile donatılmış yapay bir iklim odasına yerleştirin.

Fareyi hazneye alıştırmak için sıcaklığı ortam seviyelerine ayarlayın. Fare stabil hale geldiğinde, vücut ağırlığını kaydedin. Ardından, odanın sıcaklığını ve nemini hedef seviyelere ayarlayın. Aynı anda, ışık rahatsızlığını azaltmak için odayı bir karartma perdesi ile çevreleyin.

Hazne hedef koşullarına ulaştığında, hazne kapısını hızlı bir şekilde açın ve fareyi zorunlu çalışan tekerleğe yerleştirin. Tekerleği hareket ettirmeye başlayın ve hızı kademeli olarak artırın. Farenin vücut ısısı, eforun bir sonucu olarak yükselir. Fare maksimum çekirdek sıcaklığına ulaştıktan sonra, tekerlek hızını sabit tutun.

Tekerleği durdurmak için yorgunluk belirtileri için fareyi izleyin. Daha sonra, fareyi yapay iklim odasından çıkarın ve tartın. Fareyi ev kafesine kaydırın ve hayvanın ortam sıcaklığında iyileşmesine izin verin.

Eforlu sıcak çarpması protokolünden önceki gece, odaya alışmak için fareyi oda sıcaklığında çevre odasına yerleştirin. Gece boyunca 30 saniyelik aralıklarla ortalaması alınan sürekli çekirdek sıcaklığını veya Tc'yi toplamak için veri toplama sistemini kullanın. Eforlu sıcak çarpması protokolünün sabahında, farenin ateşi olmadığından veya bu süre zarfında aşırı stres yaşamadığından emin olmak için oda sıcaklığını artırmadan önce farenin normal günlük sıcaklık aralığı olan 36 ila 37,5 santigrat derece aralığında veya altında olduğundan emin olun.

Fare stabil hale geldiğinde ve normal dinlenme çekirdek sıcaklığı aralığına girdiğinde, yiyeceği ve suyu çıkarın ve hayvanı tartın. Hazne kapısını kapatın ve hazne sıcaklığını 37.5 santigrat derece hedefine ve %40 ila %50 bağıl neme veya istenen ortam sıcaklığı ve nemine yükseltin. Kalibre edilmiş bir sıcaklık ve nem monitörü ile oda sıcaklığını ve nemini doğrulayın.

Protokol sırasında ışığı ve rahatsızlıkları minimumda tutmak için odayı bir karartma perdesi ile çevreleyin. Uzaktan IR aydınlatmalı kameralar aracılığıyla protokol sırasında fareyi sürekli olarak izleyin. İkinci kamerayı, yürüyen tekerleğe yakın yerleştirilmiş sıcaklık ve nem monitörüne odaklayın. Hayvanın yakınında doğru sıcaklık okumalarını sağlamak için çevre odası ayar noktası için kontrolörde ayarlamalar yapın.

Hazne, sıcaklık monitöründeki ikinci kamera tarafından ölçülen hedef sıcaklığına ulaştığında, hazne kapısını hızlı bir şekilde açın ve fareyi zorunlu çalışan tekerleğe yerleştirin. Zorunlu koşu tekerleği protokolünü dakikada 2,5 metre hızla başlatın ve fare 41 santigrat derece çekirdek sıcaklığına ulaşana kadar hızı her 10 dakikada bir dakikada 0,3 metre artırın.

Çekirdek sıcaklığına ulaşıldıktan sonra, belirgin bir bilinç kaybı, geriye doğru düşme veya bayılma ve koşmaya veya tekerleğe tutunmaya devam edememe ile karakterize semptom sınırlaması ortaya çıkana kadar hızın sabit kalmasına izin verin. Farenin tekerlek üzerinde fiziksel bir tepki belirtisi olmadan üç geriye doğru döndüğü zaman noktasını onaylayın. Alternatif olarak, protokolün ne zaman durdurulacağını belirlemek için yerel IACUC kurallarına uyan insancıl bir uç nokta belirleyin. Bu son nokta, esasen tüm farelerde semptom sınırlamasının biraz üzerindedir.

Hızlı soğutma protokolünü gerçekleştirmek için, fare belirti sınırlamasına ulaştığında tekerleği durdurun ve fareyi zorunlu çalışan direksiyondan hemen çıkarın. Fareyi tartın ve oda sıcaklığında iyileşmesi için ev kafesine geri koyun. Bu süre zarfında, hazne kapısını açık bırakın ve haznenin hızlı bir şekilde soğumasını sağlamak için inkübatör ayar noktasını oda sıcaklığına getirin, bu da %99'dan fazla uzun süreli hayatta kalma ile sonuçlanır.