$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Safra sistemi, karaciğer, safra kesesi ve safrayı bağırsağa taşıyan ortak safra kanalını veya CBD'yi oluşturmak için birleşen bir kanal ağından oluşur.
Biliyer sistem reçine dökümü için, karaciğer ve safra kesesinden kanı almak için perfüze edilmiş bir fare alın.
Fareyi sırtüstü pozisyona getirin.
CBD'nin bağırsağa girmeden önce distal ucunda bulunan bir kas tabakası olan Odi'nin sfinkterini tanımlamak için karaciğerin viseral yüzeyini bulmak için karın boşluğunu bir diseksiyon mikroskobu altında görselleştirin.
Oddi sfinkterinin yanındaki CBD'de eğik bir kesi yapın.
Hortumu CBD'ye yerleştirin. Borunun diğer ucunu renkli ve radyoopak reçine süspansiyonu içeren bir şırıngaya bağlayın.
Reçine süspansiyonunu kanala enjekte edin.
Reçine CBD'den daha küçük safra kanalları ağına geçer ve sonunda karaciğer ve safra kesesinin içine yayılır. Yayılma, renkli reçinenin küçük kanalların terminalleri boyunca hareketini görselleştirerek izlenebilir.
Boruyu çıkarın ve reçinenin polimerize olmasına izin verin.
Kanalların mikro-BT görüntülerini elde edin. Radyoopak olan reçine, X-ışınlarının içinden geçmesine izin vermez, safra sistemine bir kontrast sağlar ve 3D mimarisinin analiz edilmesine yardımcı olur.
Farenin safra sistemine reçine enjekte etmeden önce, ortak safra kanalını ve portal veni ortaya çıkarmak için PBS ile ıslatılmış bir pamuklu çubuk kullanarak bağırsağı ve pankreası farenin sol tarafına hareket ettirmeye başlayın. Ardından, inferior vena kavada küçük bir enine kesi yapın. İç organ yüzeyini ve hiler bölgesini ortaya çıkarmak için karaciğerin ventral tarafını kalbe doğru çevirin ve hiler bölgesinden pankreas boyunca uzanan ve Oddi sfinkterindeki bağırsağa giden ortak safra kanalını bulun. Ortak safra kanalından yaklaşık 5 milimetrelik çevre doku alanını temizlemek için düz forseps kullanın.
Daha sonra, ortak safra kanalının altına ipek bir dikiş ipliği yerleştirerek, ortak safra kanalının etrafına gevşek bir el üstü düğüm atın. Ortak safra kanalının pankreas ve bağırsağa girdiği noktada, Oddi sfinkterinin yanında, ortak safra kanalına eğik bir kesi yapmak için yaylı makası ortak safra kanalına karşı düz tutun. Daha sonra, 1 mililitre sarı reçineyi 50 mikrolitre MV kürleme maddesi ile karıştırın ve 1 mililitrelik bir Luer şırıngasını reçine kürleme maddesi karışımı ile doldurun.
Doldurulmuş şırıngayı boru seti #1 ile bağlayın ve reçine kürleme maddesi karışımı borunun ucundan damlayana kadar boruyu doldurmak için pistona bastırın. Boruyu ortak safra kanalındaki açıklığa yerleştirmeden önce, eğimli ucun en uzun kenarı safra kanalının dorsal tarafına doğru aşağı bakacak şekilde, ortak safra kanalı insizyonunun etrafındaki alanı düzeltmek için forsepsleri kullanın. Ardından, boruyu ortak safra kanalının içine sabitlemek için ipek iplik düğümünü sıkın.
Reçineyi ortak safra kanalına enjekte ettikten sonra, safra kesesini ve tek tek karaciğer loblarını gözlemleyin. Reçinenin eşit şekilde yayılmasına yardımcı olmak için karaciğere PBS ile ıslatılmış bir pamuklu çubukla masaj yapın. Reçine dolu safra kanallarının terminal dalları karaciğer yüzeyinde belli belirsiz görünecektir. Karaciğerin yüzeyinde reçine noktaları göründüğünde veya direnç karşılandığında reçineyi enjekte etmeyi bırakın. Ardından, ortak safra kanalından çekerek boruyu çıkarın ve reçinenin dışarı sızmasını önlemek için forseps kullanarak ipek düğümü hızla sıkın.