Fare Modelinden Sinoatriyal Düğüm İzolasyonu: Murin Kalbinden SA Düğümünü Hasat Etme Prosedürü

Kalpte, sinoatriyal düğüm veya SA düğümü, kalp boyunca sürekli olarak elektrik uyarılarını başlatan ve yayan ve kalp atışının hızını ayarlayan özel kas hücreleri içerir.

SA düğümünü izole etmek için önce sırtüstü pozisyonda antikoagülan ile tedavi edilmiş ötenazi yapılmış bir fare hazırlayın. Antikoagülan tedavi, verimli doku izolasyonu için kan pıhtılarını önlemeye yardımcı olur.

Daha sonra, enine bir cilt kesisi yapın ve ardından göğüs boşluğunun içeriğine erişmek ve alttaki kalbi ortaya çıkarmak için göğüs kafesinin yan duvarlarını kesin.

Kalbi antikoagülan içeren tamponla nemlendirin. Akciğerleri trakea ile birlikte çıkarın.

Kalbi göğüs boşluğundan çıkarmak için ana kan damarlarını kesin. Eksize edilen kalbi, hassas organı tutmak için tampon içeren silikon-elastomer kaplı bir tabağa aktarın.

Kalbin tepesini sabitleyin. Şimdi, sağ atriyum içindeki alt ve üst vena kava'nın konumunu bulun. Ayrıca, vena kavaları arasındaki doku yaması içindeki S-A düğümünün yerini belirleyin.

Kalpten kanı boşaltmak için apeksi çıkarın. Şimdi, kulakçıkları ventriküllerden ayırın. Sol atriyumu çıkarmak için interatriyal septum boyunca kesin. Sağ atriyumu düz bir şekilde yatırın ve S-A düğüm dokusunu ondan çıkarın.

Ötenazi yapılmış farenin derisini bir hemostat ile tutarak başlayın ve deride, göğüs kafesinin hemen altında, sol kostal kemerden sağ kostal kemere kadar enine bir kesi yapmak için cerrahi makas kullanın. Peritonu kesmek için cerrahi makas kullanın ve karaciğeri diyaframdan dikkatlice ayırın, aşırı kanamayı önlemek için karaciğeri çentiklemeden.

Göğüs boşluğunu ortaya çıkarmak için diyaframı göğüs kafesi boyunca kesin. Kalbi ortaya çıkarmak için göğüs kafesinin yan duvarlarını, kostal kemerlerin kenarlarından köprücük kemiklerine kadar kesmek için cerrahi makası kullanın. Ardından, göğüs kafesini omzun üzerinden sabitlemek için 23 gauge bir şırınga iğnesi kullanın.

Nemli kalmasını sağlamak için kalbin üzerine ılık heparinize Complete Tyrode solüsyonu damlatmak için bir transfer pipeti kullanın. Akciğerleri ekstra ince Graefe forseps ile tutun ve akciğerleri çıkarmak için trakeayı cerrahi makasla kesin. Kalbi çıkarmak için kalbin tepesini ekstra ince Graefe forseps ile tutun ve aort ve inferior vena kava'yı cerrahi makasla kesin.

Kalbi, kürlenmiş bir silikon elastomer içeren bir Petri kabına aktarın ve kalbi 2 ila 3 mililitre ılık heparinize Tam Tyrode çözeltisi ile yıkamak için bir transfer pipeti kullanın. Kalbin tepesini bir diseksiyon pimi ile tabağa tutturun.

İnferior vena kava'yı Dumont #2 laminektomi forseps ile tutun. Sağ atriyumdaki konumlarını bulmak için alt ve üst vena kavadan 22 gauge bir şırınga iğnesi sokun, bu aynı zamanda sinoatriyal düğümün yaklaşık konumunu da tanımlar.

Sağ atriyal apendiksti Dumont #2 laminektomi forseps ile tutun ve yerinde tutmak için sağ atriyal apendiksten bir diseksiyon pimi yerleştirin. Sol atriyal apendiks için aynı işlemi tekrarlayın. Ardından, vena kava'yı kaplayan şırınga iğnesini çıkarın.

Ventriküller boyunca enine bir kesi yaparak veya kanı kalpten serbest bırakarak kalbin tepesini çıkarmak için Castroviejo makası kullanın. Daha sonra ılık heparinize Komple Tiroz solüsyonu ekleyerek kalbi yıkayın. Atriyoventriküler septum boyunca atriyoventriküler septum boyunca atriyum ventriküllerden ayrılana kadar kesmek için Castroviejo makası kullanın ve insizyonu ventriküle daha yakın tutun.

Sol atriyumu çıkarmak için interatriyal septum boyunca kesin. Düz durmasını sağlamak için diseksiyon pimlerini sağ atriyumun çevresine yerleştirin. Castroviejo makasını kullanarak atriyumdan kalan yağı, damarları veya dokuları çıkarın ve sağ atriyumdaki sinoatriyal düğümü bulun.