Fare Modelinde Sürekli İlaç İnfüzyon Sistemi: Sürekli İlaç Dağıtımı için Fare Beynine Mikro-ozmotik Pompa İnfüzyon Sistemini İmplante Etmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Beyin omurilik sıvısı veya BOS yoluyla beyne ilaç verilmesi, ilaç konsantrasyonunu önemli ölçüde azaltan kan-beyin bariyeri veya BBB ile sınırlıdır. Mikro-ozmotik pompa tabanlı bir beyin infüzyon sistemi, BBB'nin üstesinden gelen ve beyne sürekli ilaç verilmesini sağlayan küçük, implante edilebilir bir cihazdır.

Başlamak için, ilaç dağıtımı için bir araç olan yapay bir BOS veya aCSF ile kaplanmış bir mikro-ozmotik pompa alın. Şimdi, pompayı istenen ilaç çözeltisiyle doldurun. Ardından, bir infüzyon iğnesine bağlı bir kateter içeren bir beyin infüzyon düzeneği alın. Düzeneği ilaçla doldurun. Son olarak, beyin infüzyon sistemini tamamlamak için bu düzeneği mikro-ozmotik pompaya bağlayın.

Şimdi, stereotaktik bir cihaz üzerinde anestezi uygulanmış bir fare hazırlayın. Başın dış derisini çıkarın ve açıkta kalan kafatasını dezenfekte edin. Bir mikro matkap kullanarak, infüzyon sistemi için bir geçit oluşturmak üzere kafatasında bir delik oluşturun. Boyun bölgesinin arkasındaki cildi açın ve mikro-ozmotik pompayı altına yerleştirin. Eşzamanlı olarak, infüzyon iğnesini delinmiş deliğe sokun.

İğne meninkslere nüfuz eder ve ilacı beyne aşılamak için ventriküllere ulaşır. Şimdi, iğneyi sabitlemek için uygun bir yapışkan jel uygulayın. Ardından iğnenin üst kısmını çıkarın. Daha fazla deney için farenin iyileşmesine izin verin.

Ameliyattan bir gün önce, pompaları yapay beyin omurilik sıvısı veya aCSF ile doldurmak için 1 mililitrelik bir şırınga ve künt başlı iğne kullanarak beyin ozmotik pompaları hazırlayın. Ardından, pompayı aCSF'ye daldırın ve gece boyunca nazikçe sallamak için bir çalkalayıcı üzerine yerleştirin. Ertesi gün, aCSF'yi pompadan çıkarın ve fazlalık dışarı sızana kadar aCSF içinde seyreltilmiş önceden hazırlanmış ilaç solüsyonu ile tamamen doldurun.

Ardından, kateter tüplerini istenen uzunlukta kesmek için cerrahi makas kullanın. Künt uçlu bir beyin infüzyon iğnesi kullanarak, tüpleri beyin infüzyon kitine takın. Ardından, infüzyon kitindeki tüpleri ilaç çözeltisi ile doldurun. Kiti monte ettikten sonra mikro ozmotik pompaya takın. Son olarak, pompanın kurumasını önlemek için, ozmotik pompa beyin infüzyon ayarını sterilize edilmiş 50 mililitrelik bir tüp içinde aCSF'ye daldırın.

Ameliyatı başlatmak için, anestezi uygulanmış bir farenin kafasını stereotaktik bir aparata monte edin ve sabitleyin. Bir çift cerrahi makas ve kerpeten kullanarak kafatasını kaplayan dış deriyi kesin. Ardından, periferik kafatasını temizlemek için iyot kullanın. Daha sonra, ozmotik pompa beyin füzyon seti implantasyonu için cildin en dış tabakasını deri altı deriden ayırmak için boyun bölgesine yakın bir çift künt başlı makas kullanın.

İnfüzyon noktasını beyin haritasına referans olarak işaretlemek için stereotaktik cihazı kullanın. Kafatasında işaretli alanın etrafında bir delik açmak için bir tırnak matkabı kullanın, fare meninkslerini ve kan damarlarını kırmamaya dikkat edin. Daha sonra, ilgilenilen ilacı veya aCSF'yi içeren mikro-ozmotik pompa beyin füzyon setini boyun bölgesinin arkasındaki cilt altına kontrol olarak yerleştirin.

İlacın beyne infüze edilmesi için, beyin infüzyon iğnesini açılan deliğe sokun. İğneyi kafatasındaki yerine sabitlemek için yüzey hassasiyet giderici jel kullanın ve yapıştırıcı kuruyana kadar bekleyin. İğnenin üstündeki çıkıntılı parçayı kesin.