İntravital görüntüleme: Stabilize bir görüntüleme penceresi aracılığıyla fare pankreasının hücresel düzeyde gözlemlenmesi için bir yöntem

0 views • 3:40 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İntravital görüntüleme, canlı bir hayvanın hücrelerinin, hayvana implante edilen bir görüntüleme penceresi aracılığıyla görselleştirilmesini içerir. İşlevlerinden ödün vermeden hücresel dinamiklerin uzun süreli gözlemlenmesini sağlar.

Başlamak için, daha önce metal bir plaka üzerinde desteklenen bir pankreas görüntüleme penceresi ile implante edilmiş anestezi uygulanmış bir transgenik fareyi ele alalım. Taban plakası, pankreası bağırsaktan uzamsal olarak ayırır, böylece peristalsis gibi fizyolojik hareketlerden kaynaklanan hareket artefaktlarını azaltır.

Transgenik fare, pankreastaki adacıkların beta hücrelerinde eksprese edilen insülin gen promotörü altında yeşil floresan proteini veya GFP'yi eksprese eder.

Ardından, fare kuyruğunu sıkıca tutun ve yüzeydeki kirleticileri temizlemek için dezenfektan püskürtün. Lateral kuyruk damarına bir kateter yerleştirin. Kuyruk damarına kırmızı bir floresan probu ile etiketlenmiş antikorlar içeren bir çözelti enjekte edin. Bu antikorlar, kan damarlarını kaplayan hücrelere bağlanır ve onları kırmızıya boyar.

Şimdi, fareyi intravital bir mikroskopi kurulumuna kaydırın. Pankreas görüntüleme penceresini pencere tutucusuna yerleştirin. Kırmızı floresan kan damarlarıyla çevrili yeşil floresan adacık kümelerini bulmak için düşük büyütme altında görüntülemeye başlayın. Tek tek beta hücrelerinin yüksek kaliteli hücresel düzeyde görüntülemesini elde etmek için büyütmeyi artırın.

Lazer gücü de dahil olmak üzere intravital mikroskobu açarak başlayın. Vasküler kateter yerleştirmek için, işaret parmağı ve üçüncü parmağınızla kuyruğun proksimal tarafına baskı uygulayın. Gerekirse, kuyruğu bir lamba ile ısıtın. Kuyruk damarını %70 etanol spreyi ile dezenfekte edin, ardından lateral kuyruk damarına 30 gauge kateter yerleştirin ve PE-10 tüpündeki kanın yetersizliğini görselleştirin. Stabilize etmek için kateter üzerine ipek bant uygulayın.

Floresan probların kombinasyonuna göre FITC dekstran ve TMR dekstran veya diğer floresan probları uygun şekilde enjekte edin. Homeotermik ısıtma yastığı sistemi ile vücut ısısını otomatik olarak kontrol etmek için bir rektal prob yerleştirin. Ardından, intravital mikroskopi kurulumu sırasında hazırlanan pankreas görüntüleme penceresini pencere tutucusuna yerleştirin. Fareyi cerrahi platformdan görüntüleme aşamasına aktarın.

İntravital görüntüleme yapmak için, pankreas görüntüleme penceresinde pankreasın tüm görünümünü taramak için pankreasın tüm görünümünü taramak için pankreası dört kez gibi düşük bir büyütme ile görüntülemeye başlayın. İlgilenilen bölge belirlendikten sonra, sırasıyla yaklaşık 0,5 mikrometre ve 3 mikrometre yanal ve eksenel çözünürlükte hücresel düzeyde görüntüleme yapmak için 20 kat veya 40 kat gibi daha yüksek büyütmeli bir objektif merceğe geçin.

3D yapıyı veya hücre göçü gibi hücresel düzeydeki dinamikleri gözlemlemek için z-stack veya hızlandırılmış görüntüleme gerçekleştirin.

08:23

Floresan Proteinler ifade Canlı Farelerde Görüntüleme hücrealtı Yapıların Intravital Mikroskopi

Related Videos

0 Views

11:44

CXCR6.Gfp Muhabir Fare kullanma Sağlıklı ve hastalıklı Karaciğer Bağışıklık Hücreleri Uzun Vadeli intravital multiphoton Mikroskopi Görüntüleme

Related Videos

0 Views

09:17

Invaziv cerrahi biyopsiye yanıt olarak beyin tümörü hücre davranışının boyuna Intravital görüntüleme

Related Videos

0 Views

03:45

Fare Modelinde Pankreatik İntravital Görüntüleme Penceresi Kurulumu: Murin Pankreas Mikroyapısının Hızlandırılmış İn Vivo Görüntülemesi için Entegre Pankreas Görüntüleme Penceresi

Related Videos

0 Views

08:03

Fare Pankreas Adacık Hücrelerinin Alt Popülasyonlarında Görüntüleme Kalsiyum Dinamiği

Related Videos

0 Views

06:52

Pankreas intravital görüntüleme penceresine sahip bir Murine Modelinde Pankreasın Stabilize Boyuna In Vivo Hücresel Düzey Görselleştirmesi

Related Videos

0 Views

07:44

Şeffaf Silikon Pencerelerle Uzunlamasına İntravital Görüntüleme

Related Videos

0 Views

07:12

Murin Pankreasın İntravital Görüntülenmesi için Stabilize Pencere

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026