Fare ileal döngü modeli: farede bağırsak geçirgenliğini incelemek için cerrahi bir model

Patolojik koşullar altında, epitel ve endotel bariyerlerinin parçalanması bağırsak geçirgenliğini arttırır ve bağırsak içeriğinin çevredeki damar sistemine ve karın boşluğuna sızmasına neden olur. Bağırsak geçirgenliği, ileal döngü modeli kullanılarak simüle edilebilir.

Başlamak için, sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir fare hazırlayın. Karında orta hat kesisi yapın. Ameliyat sırasında organları nemli tutmak için cerrahi alanın üzerine uygun bir tamponla nemlendirilmiş steril bir pamuklu gazlı bez yerleştirin.

Bağırsağın distal kısmı olan ileumu dıştan çıkarın ve mezenteri ortaya çıkarmak için gazlı bezin üzerine yayın. İleumda, mezenterde uygun şekilde yerleştirilmiş ve herhangi bir kritik kan damarından yoksun iki ligasyon bölgesini tanımlayın. Ardından, belirlenen bölgelere bitişik harfler eklemek için mezenteri delin.

Daha sonra, sağlam bir kan kaynağı ve mezenterik membran ile izole edilmiş bir ileal döngü oluşturmak için ileumu inceleyin. Daha sonra, atık içeriğini temizlemek için döngüye uygun bir tampon enjekte edin.

Şimdi, ileal döngünün açık uçlarını bağlayın. Kemotaktik bir protein süspansiyonu olan kemokini döngüye enjekte etmek için bir şırınga kullanın ve şişmesine neden olun. Organları karın bölgesine geri koyun.

İnsizyonu dikin. Farenin iyileşmesine izin verin. Sonunda, kemokin molekülleri ileal duvardan bitişik kan damarlarına geçerek iltihaplanmaya ve lökosit akışına neden olur.

Cerrahi bir anestezi düzlemine ulaştıktan sonra, karın orta hattının kürkünü alkollü bezlerle veya% 70 etanol ile ıslatılmış bir gazlı bez süngerle ovarak başlayın. Hipotermiyi önlemek için geniş bir kürk alanını alkolle ıslatmayın. Makas kullanarak orta hat laparotomisi yapın. Karnın ortasında yatay bir kesi yapın ve karın içi organlara zarar vermemeye dikkat ederek karın zarını ortaya çıkarın.

Önceden kesilmiş ıslak pamuklu gazlı bezi açıkta kalan karın içi boşluğun üzerine yerleştirin. Çekumu harekete geçirmek ve dışsallaştırmak için ıslak pamuklu çubuklar kullanın ve dikkatlice ıslak pamuklu gazlı bez üzerine yerleştirin. Ardından, ileumu harekete geçirin ve nazikçe dışlayın. Mezenterik damarları ve kan akışını bozmadan ıslak pamuklu gazlı bez üzerine en az 6 santimetre terminal ileum yerleştirin.

Sıcak HBSS ile maruz kalan dokuları her zaman nemli tutun. Çekuma yakın mezenterde ileumu besleyen ana arteri tanımlayın. Ardından, mezenterde kritik kan damarlarından arınmış iki ligasyon bölgesi bulun. Terminal ileumu künt doku forsepsleri ile sıkıca tutun ve kan damarlarından kaçınarak mezenteri fenestrate etmek için ince uçlu forseps kullanın.

İpek dikişi perforasyonun üzerine yerleştirin ve ilk ligasyonu oluşturmak için cerrahi bir düğüm atın. İlk bitişik harften 4 santimetre uzakta ölçmek için cetveli kullanın ve ikinci bitişik harfi oluşturun. 4 santimetrelik ileal halkayı izole etmek için her ligasyonun yanında ince bir makasla dikkatlice kesin, kan akışını ve mezenterik membranı sağlam tutun.

10 mililitrelik bir şırıngaya bağlı esnek sarı bir besleme tüpü kullanarak ileal döngü segmentinin içeriğini ılık HBSS ile nazikçe yıkayın. Ameliyat bölgesini temiz tutmak için lümen içeriğini karın boşluğundan dışarı attığınızdan emin olun. Yıkanmış ileal halkanın kesilen iki ucunu ipek sütür ile bağlayın.

Bağırsak lümenine FITC-dekstran veya kemokin gibi 250 mikrolitre reaktifi yavaşça enjekte etmek için 30 gauge iğneli 1 mililitrelik bir şırınga kullanın. İleal döngü şişer ve mukozanın orta derecede gerilmesine neden olur.

Karın duvarını bir iğne tutucu, anatomik forseps ve ters kesme iğnesi ile 3.0 emilmeyen ipek dikişler kullanarak kapatın. Hipotermiyi önlemek için hayvanı kuruttuktan sonra, kuluçka süresi boyunca sıcaklık ayarlı bir anestezi odasına koyun.