JoVE Encyclopedia of Experiments
Biyoloji
0 görüntüleme • 3:17 dk • July 8th, 2025
Gözün ön kısmı, ışık ışınlarının iletilmesine izin veren şeffaf bir tabaka olan kornea ile kaplıdır. Kornea, göz çevresindeki beyaz bir koruyucu doku olan skleraya kadar uzanır. Gözün ince bir sklera halkası ile çevrili korneadan oluşan kısmı korneoskleral düğmedir.
Korneoskleral düğmeyi çıkarmak için, bir Petri kabına sağlam bir domuz gözü yerleştirin. Sklera kapağına erişmek için sklera etrafındaki müsilajlı bir örtü olan konjonktivayı ve çevresindeki göz dışı kasları çıkarın. Göz yüzeyindeki kirletici mikroorganizmaları temizlemek için göze uygun bir dezenfektan solüsyon uygulayın.
Dezenfektanı bir tampon solüsyonla yıkayın. Dezenfekte edilmiş gözü taze bir kültür kabına aktarın. Kornea sınırına yakın sklera üzerinde bir kesi yapın. Bu açıklığı kullanarak, gözü iki parçaya bölmek için tam bir çevresel kesim yapın.
Skleraya bağlı uveal kaplamayı bulmak için ön segmentin iç tarafını görselleştirin. Bu doku, pigmentli iris, halka şeklinde bir siliyer cisim ve vasküler koroid tabakasının bir kısmından oluşur. Korneoskleral tabakayı görselleştirmek için uvevayı çıkarın. Daha fazla tahlil için düğmeyi steril bir tampon solüsyonunda saklayın.
Göz küresini bir Petri kabına aktarmak için steril forseps kullanın. Bir neşter bıçağı # 15 ve forseps kullanarak göz küresinin etrafındaki konjonktiva ve kas dokusunu çıkarın. Daha sonra, optik siniri forseps ile tutarken, göz küresini yavaşça kaldırın ve steril PBS ile doldurulmuş yarım litrelik bir kavanoza aktarın.
Tüm gözbebekleri çevredeki dokudan temizlendikten sonra, onları PBS'de% 3 povidon-iyot ile doldurulmuş başka bir yarım litrelik kavanoza taşımak için steril forseps kullanın. Gözbebekleri bir dakika kavanozda kaldıktan sonra, steril PBS içeren üçüncü bir kavanoza aktarın.
Temiz bir Petri kabına bir göz küresi yerleştirin ve sabit tutmak için forsepsleri kullanın. # 10A neşter bıçağı ile korneanın yakınında bir kesim yapın. Korneayı çıkarmak için makas kullanın ve etrafını saran yaklaşık 3 milimetre sklera bırakın. Makasın keskin ucunun supra-koroidal boşlukta olduğundan ve irisi delmediğinden emin olun.
Korneoskleral düğmeyi forseps ile tutun ve uveal dokuyu nazikçe ayırmak için başka bir çift sivri uçlu forseps kullanın. Ardından, göz küresinin geri kalanından ayırmak için korneoskleral düğmeyi kaldırın. Düğmeyi PBS'de% 1.5'lik bir povidon-iyot çözeltisinde kısaca durulayın. Ardından, düğmeyi steril PBS'ye 12 oyuklu bir plakaya yerleştirin.