JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:24 dk. • July 8th, 2025
Omurgalı gözü, lensin önünde yer alan ön segmente ve lensin arkasında yer alan arka segmente bölünmüştür. Ön segment kornea, sulu mizah, iris, siliyer cisim ve lensi içerir; arka segment ise vitreus mizahı, retina, koroid ve optik siniri içerir. Oküler bozuklukların patofizyolojisini incelemek için ön segment kültürlenebilir.
Ön segmenti bir hayvan modelinden ayırmak için, yeni izole edilmiş bir domuz gözü ile başlayın. Ekstraorbital dokuyu gözden çıkarın ve antibiyotik takviyeli tampon ile yıkayın. Gözün kirlenmesini önlemek için gözü steril, antibiyotiğe batırılmış bir gazlı bezin üzerine yerleştirin.
Bir neşter kullanarak, korneoskleral kabuğu - fibröz ve vasküler tabakayı açmak için ekvator bölgesinin yakınındaki gözü kesin. Ön segmenti arka göz kısmından izole etmek için kavisli makas kullanın. Ön göz segmentini dikkatlice çevirin. Ardından, camsı mizahı çıkarın ve lensi çıkarın.
Sulu mizahın gözden dışarı aktığı pigmentli bir doku olan trabeküler ağı ortaya çıkarmak için irisi radyal olarak iris köklerine doğru eksize edin. İnce bir doku bandı bırakarak siliyer cismin izlerini çıkarın. Kalan pigmenti çıkarmak için korneayı ıslak bir pamuklu çubukla silin. Ön göz segmenti artık daha fazla deney için kültürlenebilir.
Ekstra orbital dokuları çıkardıktan ve gözleri Antibiyotik-Antimikotik-PBS ile yıkadıktan sonra, gözü kesmek için Antibiyotik-Antimikotik-PBS ile ıslatılmış gazlı bez üzerine yerleştirin. Gözün ekvatoruna yakın bir kesi oluşturmak için steril bir tıraş bıçağı veya neşter kullanın. Ardından, ön gözü izole etmek için kavisli cerrahi makas kullanarak gözü yarıklayın.
Ön segmentten vitreus mizahını almak için kürek olarak mikromakas kullanın ve lensi mikromakasla ön segmentten çıkarın. Yavaş yavaş, trabeküler ağ görünür hale gelene kadar irisi iris köküne radyal olarak kesin. Tüm trabeküler ağ örgüsünü ortaya çıkarmak için kesiği irisin etrafında 360 derece uzatın ve gerekirse trabeküler ağ örgüsünü kaplayan kalan kalıntı irisi temizleyin.
Trabeküler ağ bölgesinin arkasındaki siliyer cisim kalıntılarını kesin ve sadece 1 milimetre ince bir doku bandı bırakın. Ön segmenti petri kabına yerleştirdikten sonra, bir pamuklu çubuğu ortamda ıslatın ve herhangi bir pigmenti çıkarmak için korneanın ortasına hafifçe vurun. Gözleri forseps ile tutun ve silerek sklera etrafındaki fazla pigmenti çıkarın.