Kriyojenik Saman Kullanarak Tavşan Embriyosu Vitrifikasyonu: Tavşan Embriyolarını Uzun Süreli Depolama için Korumak İçin Ultra Hızlı Bir Soğutma Tekniği

0 görüntüleme3:15 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Embriyo vitrifikasyonu, embriyoları son derece hızlı oranlarda ultra düşük sıcaklıklara soğutan ve uzun süreli depolamalarını kolaylaştıran ultra hızlı bir kriyoprezervasyon tekniğidir.

Başlamak için, hasat edilmiş tavşan embriyolarını uygun ortamda alın. Embriyoları, düşük konsantrasyonlarda hücreye nüfuz eden kriyoprotektan - etilen glikol veya EG ve dimetil sülfoksit veya DMSO içeren dengeleyici çözelti ile inkübe edin. EG ve DMSO, hücre zarları boyunca yayılır, hücrelerin içindeki su moleküllerinin yerini alır ve hücre içi buz kristali oluşumunu önler.

Daha sonra, kriyoprotektanların yeterli nüfuz etmesini ve yeterli hücre içi su akışını sağlamak için embriyoları daha yüksek konsantrasyonlarda EG ve DMSO içeren vitrifikasyon solüsyonu ile inkübe edin ve hücreleri donma hasarından koruyun.

Steril bir kriyojenik saman taşıyıcıyı bir mikro dağıtıcıya bağlayın. Mikrodağıtıcıyı kullanarak, pipeti istediğiniz ortamla uygun seviyeye kadar doldurun. Daha sonra, bir hava kabarcığı aspire edin, ardından minimum hacimde embriyo içeren vitrifikasyon çözeltisi ve başka bir hava kabarcığı ekleyin.

İlk medya fraksiyonu toz kaplı pamuk tapayı ıslatıp polimerize edene kadar medyayı tekrar aspire edin, bu da pipetin ucunu kapatır. Diğer ucunu hidrofobik bir saman tapası ile kapatın. Hava ve medya segmentleri, kapalı taşıyıcı içindeki embriyoları izole etmeye yardımcı olur.

Pipeti -196°C'de kısa bir süre sıvı nitrojene daldırın. Taşıyıcı, embriyoları cam benzeri amorf bir faza katılaştırarak yüksek soğutma oranları sağlarken, düşük hacimli vitrifikasyon çözeltisi ve kullanılan kriyoprotektanlar ozmotik stresi azaltır. Metabolik aktivitesi askıya alınan vitrifiye embriyolar kullanıma kadar saklanabilir.

Embriyonik vitrifikasyon için, embriyoları 2 dakika boyunca dengeleme solüsyonuna daldırın, ardından vitrifikasyon solüsyonunda 1 dakikalık bir inkübasyon yapın. Kuluçka süresinin sonunda, embriyoları 125 mikrolitrelik plastik bir mini pipete yükleyin ve pipetin kapalı ucunu uygun bir 1 mililitrelik mikrodispenser ile birleştirin. Saman uzunluğunun üçte birine kadar baz ortamını aspire edin, ardından küçük bir hava kabarcığı izleyin.

Daha sonra, embriyoları 40 mikrolitre vitrifikasyon solüsyonunda aspire etmek için bir stereomikroskop kullanın, ardından ilk sıvı fraksiyonu mini pipetin pamuk ucuna kadar hareket ettirmek için yeterli baz ortamında başka bir küçük hava kabarcığı kullanın. Ardından, mini pipetin açık ucunu bir pipet tapası ile kapatın, vitrifikasyon elde etmek için mini pipeti doğrudan sıvı nitrojenin içine daldırın ve mini pipeti bir sıvı nitrojen dewarında saklayın.

09:35

Modifiye MicroSecure Vitrifikasyon: İnsan Blastosistlerinin A, Güvenli Basit ve Etkili Kryoprezervasyon Prosedürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:59

İnsan blastosist biyopsisi ve vitrifikasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:53

Koyunlarda Erişkin ve Prepubertal Yumurtalıklardan Toplanan In Vitro Olgunlaşmış Oositlerin Vitrifikasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:36

Hamster Oosit ve Fare Embriyolar Toplama ve Kriyoprezervasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:10

Preimplantasyon Sığır Embriyolar, Koyun ve Keçi, Kriyoprezervasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:00

Etilen Glikol Tabanlı Vitrifikasyon Fare Embriyolar Kriyoprezervasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:06

I · Cryo Kit kullanarak Fare Sperm Kriyoprezervasyon ve Kurtarma

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:24

Vitrifikasyon Tabanlı Kriyoprezervasyon: Biyolojik Örnekleri Uzun Süreli Depolama için Çok Düşük Sıcaklıklarda Korumak İçin Ultra Hızlı Bir Soğutma Tekniği

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:31

Tavşan Embriyosu Çözdürme: Embriyo Transferi için Dondurularak Saklanmış Tavşan Embriyolarını Geri Kazanmak İçin Bir Isınma Prosedürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:32

Zebra balığı Spermatogonia bütün testis iğne tarafından dondurma hızlı soğutma dalmış

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026