JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:15 dk. • July 8th, 2025
Embriyo vitrifikasyonu, embriyoları son derece hızlı oranlarda ultra düşük sıcaklıklara soğutan ve uzun süreli depolamalarını kolaylaştıran ultra hızlı bir kriyoprezervasyon tekniğidir.
Başlamak için, hasat edilmiş tavşan embriyolarını uygun ortamda alın. Embriyoları, düşük konsantrasyonlarda hücreye nüfuz eden kriyoprotektan - etilen glikol veya EG ve dimetil sülfoksit veya DMSO içeren dengeleyici çözelti ile inkübe edin. EG ve DMSO, hücre zarları boyunca yayılır, hücrelerin içindeki su moleküllerinin yerini alır ve hücre içi buz kristali oluşumunu önler.
Daha sonra, kriyoprotektanların yeterli nüfuz etmesini ve yeterli hücre içi su akışını sağlamak için embriyoları daha yüksek konsantrasyonlarda EG ve DMSO içeren vitrifikasyon solüsyonu ile inkübe edin ve hücreleri donma hasarından koruyun.
Steril bir kriyojenik saman taşıyıcıyı bir mikro dağıtıcıya bağlayın. Mikrodağıtıcıyı kullanarak, pipeti istediğiniz ortamla uygun seviyeye kadar doldurun. Daha sonra, bir hava kabarcığı aspire edin, ardından minimum hacimde embriyo içeren vitrifikasyon çözeltisi ve başka bir hava kabarcığı ekleyin.
İlk medya fraksiyonu toz kaplı pamuk tapayı ıslatıp polimerize edene kadar medyayı tekrar aspir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin