Tavşan Embriyosu Çözdürme: Embriyo Transferi için Dondurularak Saklanmış Tavşan Embriyolarını Geri Kazanmak İçin Bir Isınma Prosedürü

Embriyo çözdürme, dondurularak saklanmış donmuş embriyoların ısıtıldığı ve yeniden sulandırıldığı, biyolojik aktivitelerinin geri kazanıldığı bir işlemdir.

Dondurularak saklanmış tavşan embriyolarını kapalı bir kriyojenik pipette çözmek için, pipeti sıvı nitrojenden çıkarın. Minimum hacimde kriyoprotektan içeren besiyerine sahip embriyolar, pipet içindeki hava ve medya segmentleri ile fiziksel olarak izole edilir. Pipeti kısa bir süre için havaya yerleştirin, aksi takdirde daha yüksek sıcaklıklara maruz kalma sırasında embriyo hasarına neden olan sıkışmış sıvı nitrojen buharlarının salınmasını kolaylaştırın.

Kriyojenik sıvı nitrojen sıcaklıklarından daha yüksek donma sıcaklıklarına hızlı yükseliş, kriyojenik saman içinde buz kristali oluşumunu başlatarak embriyo hasarı riskini taşır. Buz kristalleri oluşmaya başladığında, pipeti hemen eşit çözülme için hafif çalkalama ile sıcaklık kontrollü bir su banyosuna daldırın. Bu adım, embriyoları buz kristali hasarından koruyarak buz kristallerini ortadan kaldırır.

Saman tapasını çıkarın. Pipetin kapalı ucunu kesin; İçeriği sakaroz içeren ortam içeren bir kültür plakasına bırakmak için bir mikro dağıtıcı takın. Ortam, kriyoprotektanların em