Tavşana Embriyo Transferi: Yumurtlayan Alıcı Dişi Tavşan Modelinin Yumurta Kanalına Laparoskopi Eşliğinde Embriyo Transferi İçin Bir Prosedür

Embriyo transferini gerçekleştirmek için döllenmemiş bir tavşan geyiği alın. Tavşanı kas içine gonadotropin salgılatıcı hormonun sentetik bir analogu ile enjekte edin. Bu prosedür yumurtlamayı indükler ve tavşanın yalancı gebelik sergilemesine izin verir - vücudun canlı bir fetüse sahip olmadan hamilelik benzeri semptomlar sergilediği ve sonraki adımlarda embriyonun hayatta kalma şansını artıran bir durum.

Tavşanı uyuşturun ve ayakları başının üzerinde olacak şekilde eğimli bir pozisyonda sırtüstü yatırın. Bu pozisyon karın organlarını yukarı doğru kaydırarak üreme organlarından yeterli boşluk sağlar. Karın bölgesinin ön kısmında bir açıklık açın. Üreme sistemini görselleştirmek için periton boşluğunun içine endoskopik bir kamera yerleştirmek için bu alanı kullanın.

Şimdi, canlı embriyolar içeren bir şırınga-kateter düzeneği alın. İğneyi yumurta kanalının yakınına yerleştirin – embriyoyu uterusa doğru geçiren bir kanal. Kateteri, huni şeklindeki boşluğun veya infundibulumun ucundan, yumurta kanalının uzun bir boru şeklindeki pozisyonu olan ampullaya ulaşana kadar ilerletin.

Embriyoları ampullanın içine bırakın. Kateteri geri çekin ve kamerayı çıkarın. Kesi bölgesini kapatın. Tavşanı kafesine aktarın ve izleyin. Embriyolar, ampuller bölgeden uterus boynuzuna doğru göç eder - uterusun implantasyonun gerçekleştiği kısmı. Sağlıklı embriyolar implante edilir ve sonunda başarılı bir hamilelik elde edilir.

Transfer gününde, taze veya çözülmüş embriyoları stereo mikroskop altında 37 santigrat derece baz ortamında durulayın ve uygun şekilde yapılandırılmış 17 gauge epidural kateteri 1 mililitrelik bir şırıngaya takın. Katetere bir santimetre baz ortamı aspire edin ve ardından küçük bir hava kabarcığı uygulayın. Daha sonra, 5 ila 7 embriyo ve 10 mikrolitre baz ortamını aspire edin, ardından son bir santimetrelik baz ortamında başka bir küçük hava kabarcığı izleyin.

Embriyolar yüklendikten sonra, anestezi uygulanmış bir alıcı tavşanı ısınma aşamasında bir kafese yerleştirin ve hayvanın gözlerine merhem sürün. Pedal refleksine yanıt verilmediğini onayladıktan sonra, kürkü ventral karın bölgesinden tıraş edin, cerrahi alanı klorheksidin glukonat sabunu ile temizleyin ve kalan tüyleri alın.

Alanı, cerrahi alan için bir delik bulunan steril bir örtü ile örtün ve karın boşluğuna 5 santimetre, ksifoid işlemine 2 santimetre kaudal bir endoskopik trokar yerleştirin ve periton boşluğunu şişirmek için basınç düzenleyici bir mekanik insüflatör kullanın.

Endoskop kamerasını endoskopik trokardan geçirin ve 17 gauge epidural iğneyi infundibulumdan 2 ila 3 santimetre uzaklıktaki kasık bölgesine yerleştirin. Yüklü kateteri epidural iğneden karın içine yerleştirin ve epidural kateterin 1 ila 2 santimetresini ampulladaki infundibulumdan geçirin.

Embriyoları yumurta kanalına bırakmak için kateter pistonuna hafifçe bastırın. Her iki hava kabarcığı da kateterden çıkmalıdır. Embriyolar serbest bırakıldıktan hemen sonra kateteri çıkarın ve embriyoların yokluğunu doğrulamak için kalan ortamı aspire edin ve serbest bırakın.

Embriyoların başarılı bir şekilde transferini onayladıktan sonra, epidural iğneyi ve endoskop kamerasını çıkarın ve abdominal karbondioksiti endoskopik trokardan serbest bırakın. Trokar insizyonunu klorheksidin solüsyonu ile temizleyin ve yarayı mikronize alüminyum ve plastik bir pansuman ile kapatın. Daha sonra, hayvanı uygun antibiyotikler ve analjeziklerle tedavi edin ve tamamen iyileşene kadar hayvanı izleyin.