Rekombinant Adeno İlişkili Virüs Temelli Gen Dağıtımı: Kemirgen Modelinde Transgen Teslimi ve Kardiyak Spesifik İfade İçin Bir Teknik

Rekombinant adeno-ilişkili virüs, rAAV, belirli bir hücre tipini hedeflemek ve genetik yükünü gen ekspresyonu için konak hücre çekirdeğine taşımak için genetik olarak tasarlanmış küçük, tek sarmallı bir DNA virüsüdür.

Kriyo anestezi uygulanmış bir fare yavrusunu kısıtlayarak başlayın. Sırt cildini sterilize edin ve istenen transgeni kardiyak spesifik bir promotör boyunca taşıyan rAAV vektörünü deri altına enjekte edin. Vektör vasküler sistem tarafından emilir ve kalp de dahil olmak üzere uzak organlara ulaşır.

Burada, rekombinant virüs kardiyomiyositin yüzeyine yapışır ve endositoz yoluyla bir endozoma içselleştirilir. Endozom içinde, viral kapsid kısmen parçalanır ve viral litik proteinleri açığa çıkarır. Bu protein, vektörün sitoplazmaya kaçtığı endozomal zarda gözeneklere neden olur.

Vektör sitoplazmik mikrotübüller boyunca hareket eder ve nükleer gözenekten girer. Çekirdeğe girdikten sonra, viral kapsid genomunu serbest bırakmak için parçalarına ayrılır. Hedef geni taşıyan tek sarmallı DNA daha sonra çift sarmallı DNA'ya dönüştürülür.

DNA transkripsiyonunu takiben, üretilen mRNA sitoplazmaya hareket eder. Burada mRNA, kardiyomiyositlerdeki hedef proteini eksprese eden translasy