JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 2:15 dk. • July 8th, 2025
Nanoblade'ler, kapsüllenmiş viral genetik materyal içermeyen sentetik virüs benzeri parçacıklardır, bu da onları konakçı hücrelere yabancı kargo için uygun taşıyıcılar haline getirir. Bu nanobladeler, nanobladeleri in vitro olarak birleştirmek için kullanılan ökaryotik üretici hücrelerden türetilen lipid çift katmanlı zar ile çevrili fare lösemi virüsünün retroviral çekirdeği kullanılarak yapılmıştır.
Çekirdek, hedef genom dizisine özgü sgRNA ile komplekslenmiş Cas9 enzimini içerir. Çekirdek proteinler, lipid çift tabakasından geçen bir transmembran alanı veya TM içeren zarf proteinleri ile çevrilidir. TM, iki katmanlı kaplamadan çıkıntı yapan hücre dışı bir glikoproteinli yüzey alanına veya SU'ya bağlanır.
Gen düzenleme için nanoblade'leri kullanmak için, yapışık hedef hücrelerden oluşan bir kültür alın ve bunu nanoblade solüsyonu ile destekleyin. Kültürde, bir nanoblade'in çıkıntılı SU'su, konak hücre yüzeyindeki karşılık gelen reseptörü tanır ve ona bağlanır. Bu, SU etki alanı yapısında değişikliklere yol açarak serbest bırakılmasını kolaylaştırır.
Bu değişiklikler, TM alanındaki konformasyonel değişiklikleri tetikler ve bu daha sonra konak zarına bağlanır. Bu bağlanma, nanoblad
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin