Hidrodinamik Gen Dağıtımı: Murin Hepatositlerinde Ekzojen DNA'nın Kuyruk Ven Enjeksiyonu ile İn Vivo Transfeksiyonu İçin Bir Teknik
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:48 dk. • July 8th, 2025
Hidrodinamik gen transferini gerçekleştirmek için, ilgilenilen geni taşıyan rekombinant plazmitler içeren salin bazlı bir çözelti ile doldurulmuş bir şırınga alarak başlayın. Daha sonra, bir fare modeli alın ve kuyruğun tabanına hızlı bir şekilde büyük miktarda plazmit çözeltisi enjekte edin, böylece plazmit çözeltisinin kuyruk damarına intravenöz olarak enjekte edilmesini sağlayın.
Yüksek hacimli plazmitlerin basınçlı enjeksiyonu, hidrodinamik kuvvet adı verilen mekanik bir kuvvet üretir ve bu da oksijensiz kanı kalbe taşıyan bir damar olan inferior vena kava'daki intravasküler basıncı arttırır.
Büyük sıvı hacmi, kalbin sağ ventrikülünde tıkanıklığa neden olur ve kan yönünde tersine dönmeye zorlar. Bu adım, plazmit çözeltisini karaciğere taşıyan hepatik damara girmeye zorlar.
Plazmitler, hepatik sinüzoidlerin içinde hareket eder - karaciğerde endotel hücreleri tarafından kaplanan boşluklar. Artan kan hacmi, plazmitlerin endotel tabakasına nüfuz etmesine yardımcı olur ve çevredeki hepatositlerin - karaciğer hücrelerinin yakınına ulaşmalarına yardımcı olur.
Plazmit çözeltisinin hızlı akışı, geçici gözenekler oluşturan hepatosit hücre zarı üzerinde baskıya neden olur. Bu gözenekler,
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin