JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 2:44 dk. • July 8th, 2025
Hepatik steatoz, belirgin bir karaciğer hücresi tipi olan hepatositlerde aşırı yağ birikimi ile karakterize patolojik bir durumdur. Yağlar, hepatositlerin sitoplazmasında çeşitli boyutlarda lipit damlacıkları şeklinde birikir.
Yapısal olarak, bir lipit damlacığı, trigliseritler ve kolesterol esterleri gibi nötr, hidrofobik yağlardan oluşan bir çekirdek içerir. Çekirdek, çeşitli proteinlerle süslenmiş bir fosfolipid tek tabakası ile çevrilidir.
Yağ birikimini görselleştirmek için, yapışık bir hepatosit kültürü içeren çok kuyulu bir plaka alın. Hücreler, içlerinde lipit damlacık birikimini indüklemek için steatojenik bir ortam ile ön işleme tabi tutulur.
Hücrelere yayılan ve proteinleri çapraz bağlayan istenen paraformaldehit konsantrasyonunu ekleyin. Bu adım proteazları devre dışı bırakır ve hepatosit yapısını korur. Paraformaldehiti atın ve izopropanol içinde çözünmüş organik boyayı içeren Oil-red-O çözeltisini ekleyin.
İzopropanol, idareli çözünür Yağ-kırmızı-O molekülleri için bir taşıyıcı çözücü görevi görür. Bu, boya moleküllerinin sabit hepatositlere girmesine ve sonunda lipit damlacıklarına ulaşmasına yardımcı olur. İçeri girdikten sonra, boya, daha yüksek afinitesi nedeniyle
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin