Nil kırmızısı boyama: alglerde hücre içi nötr lipidleri tespit etmek ve ölçmek için bir teknik

Algler, biyodizel üretimi için nötr lipitler gerekli olan çeşitli lipitler üreten suda yaşayan fotosentetik organizmalardır.

Nötr lipitleri tespit etmek ve miktarını belirlemek için, optimum hacimde bir alg süspansiyonu ve etanolü siyah bir mikrotitre plaka kuyusunda karıştırın. Çoğu lekenin nüfuz etmesini önleyen alg hücre duvarı ve zarı, etanole maruz kaldığında geçirgen hale gelir. Daha sonra, etanolü yağda çözünen bir floresan boya ile birleştirin - Nil kırmızısı. Bu karışımı yosun içeren kuyuya ekleyin.

Mikrotitre plakasını bir spektrofotometreye yerleştirin. Boya ve algler arasındaki etkileşimi kolaylaştırmak için aralıklı çalkalama ile inkübasyonu sağlayan bir program ayarlayın.

Nil kırmızısı hidrofobik olduğu için sitoplazmayı kolayca geçemez. Etanol gibi çözücüler, Nil kırmızısı ile birleştiğinde, boyayı harekete geçirir ve sitoplazmada dağılmış lipit cisimciklerine ulaşmasına yardımcı olur. Nil kırmızısı daha sonra lipit cisimlerine nüfuz eder ve orada çözünür, böylece lipitleri lekeler.

Lipid eksikliği olan hücreler, koyu cisimlere sahip floresan halkalar olarak görünürken, lipid açısından zengin hücreler, lipit cisimlerinin biriktiği yerde parlak turuncu-kırmızı bir par