Yumuşak Doku Örneklerinin Eozin Boyama: Spesifik Doku Mikroyapılarını Görselleştirmek için Tüm Fare Böbrek Boyaması için Eozin Bazlı Bir Prosedür

0 görüntüleme3:14 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yumuşak doku mikro ortamlarında hücre sitoplazmasına özgü boyama için, yeni hasat edilmiş bir fare böbreği elde edin. Formaldehit, buzlu asetik asit ve metanol içeren fiksatif bir çözelti ile muamele edin. Düşük sıcaklıklarda inkübe edin.

Formaldehit hücrelere nüfuz eder, proteinleri proteinlere ve proteinleri nükleik asitlere çapraz bağlar. Metanol, dokudaki suyun yerini alır ve proteinleri pıhtılaştırır. Asetik asit, hücre içi asitleşmeye ve doku şişmesine neden olur, böylece metanolün neden olduğu doku büzülmesine karşı koyar.

Fiksasyon, enzimleri inaktive eder ve sonraki boyama için doku morfolojisini stabilize eder. Tampon kullanarak fazla fiksatifleri çıkarın. Dokuyu asidik bir boya olan eozin Y ile inkübe edin.

Eozin sabit hücrelere nüfuz eder ve sitoplazmaya girer. Asetik asit muamelesinden sitoplazmanın asidik ortamı, sitoplazmik proteinlerin amino gruplarının maksimum protonasyonuna neden olur.

Negatif yüklü fonksiyonel gruplara sahip eozin, protonlanmış protein grupları ile elektrostatik olarak etkileşime girerek kararlı bir boya-protein kompleksi oluşturur ve birikme üzerine sitoplazmayı pembeye boyar. İnkübasyon sonrası, lekeli böbreği küçük parçalara ayırın, ardından artan etanol konsantrasyonlarında doku dehidrasyonu yapın.

Böbrek dokusunu parafin mumuna gömün. Bir mikrotom kullanarak ince doku kesitleri elde edin. Ayrıca, mikroskobik analiz için bölümleri yeniden sulandırın.

Boyanmamış hücre çekirdekleri, pembe lekeli bir sitoplazmaya karşı beyaz görünür ve fırça kenarları olmayan düzleştirilmiş epitel hücreleri ile kaplı proksimal kıvrımlı tübüller veya toplayıcı kanallar içeren proksimal kıvrımlı tübüller gibi böbrek mikro yapılarının görselleştirilmesini sağlar.

Yumuşak doku örneklerini sabitleyerek başlayın. 50 mililitrelik bir santrifüj tüpünü 9.5 mililitre% 4 formaldehit ve 0.5 mililitre buzlu asetik asit içeren fiksatif bir çözelti ile doldurun. Yumuşak doku örneğini santrifüj tüpüne ekleyin ve 24 ila 72 saat buzdolabında saklayın.

Soğutmadan sonra, yumuşak doku örneğini 1 saat boyunca DPBS solüsyonu ile yıkayın. Daha sonra, numuneyi 2 mililitre eozin Y-boyama solüsyonuna koyarak boyayın ve 24 saat boyunca yatay bir çalkalama plakası üzerinde inkübe edin.

Ertesi gün, yumuşak doku örneğini numune kabından dikkatlice çıkarın ve fazla boyama maddesini selüloz kağıt mendil ile çıkarın. Depolama ve daha fazla kullanım için etanol buhar fazının üzerinde konik bir kaba koyun.

07:41

Katı, sabit ve lekeli, genel olarak, milimetre ölçekli örnekler için bölüm ücretsiz 3D Histoloji mikro bilgisayarlı tomografi tarafından katıştırma

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:06

İnsan Fibromusküler Doku Görselleştirmek için Fosfotungstik Asit Hazırlık ile Mikro X-Ray Bilgisayarlı Tomografi Kullanımı

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:09

İntratümöral Heterojenite, Oncostreams ve Invasion'ın Mekansal ve Moleküler Karakterizasyonu için Glioma Alt Bölgelerinin Lazer Yakalama Mikrodizması

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:43

Fare böbrek dokusunda bakteriyel kolonizasyonun floresans görüntülemesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:43

Böbreğin üç boyutlu görüntülenmesi için tam montajlı organ boyama tekniği

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:16

Organ Kültür ve Fare Wolffian Kanallarının Tüm Dağı Immunoflorasan Boyama

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:22

Kardiyak Morfoloji Ekokardiyografik ve histolojik muayene fare

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:37

Yalıtım, fiksasyon ve fare böbreküstü bezlerinin ayirt görüntüleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:18

Optik temizleme ve Immünolabeled böbrek dokusu görüntüleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:01

X-Ray Spesifik Boyama Yöntemi ve Nanoskobik Bilgisayarlı Tomografi Ile Yumuşak Doku Örneklerinin 3Boyutlu Görüntülemesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026