JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:33 dk. • July 8th, 2025
Kanser metastazı sırasında, birincil bir tümörden gelen tümör hücreleri dolaşım sistemi boyunca hareket eder, uzak organlara ekstravaze olur ve ikincil tümörler oluşturur.
4T1 hücreleri, yüksek metastatik meme kanseri hücreleri enjekte edilmiş bir meme kanseri fare modelinde akciğer metastazını değerlendirmek için, hasat edilen akciğerlerden izole edilen 4T1 hücrelerini içeren bir hücre süspansiyonu hazırlayın. Süspansiyonu santrifüjleyin ve hücreleri 6-tiyoguanin, 6-TG - bir guanin analoğu içeren ortamda yeniden süspanse edin. Hücre süspansiyonunu bir kültür plakasına tohumlayın.
6TG, spesifik transferaz enziminin onu toksik bir nükleotit olan 6-TG nükleotidine dönüştürdüğü normal hücrelere girer. Bu sitotoksik nükleotidler DNA'ya dahil edilerek DNA hasarına neden olur ve hücreleri kültürden seçici olarak elimine eder. 4T1 hücreleri, toksik nükleotidler oluşturma yeteneğini azalttı, bu da hayatta kalmalarını ve plakaya yapışmalarını kolaylaştırdı. Hücrelerin çoğalma yeteneğine bağlı olarak koloniler oluştururlar.
Hücreleri metanol ile tedavi edin. Metanol hücrelere nüfuz eder ve hücresel proteinleri denatüre eder. Hücreleri metilen mavisi ile inkübe edin.
Pozitif yüklü boya hücrey
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin