JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:32 dk. • July 8th, 2025
Bir doku bölümündeki kıkırdak ve kemik bölgelerini görselleştirmek için, ilgilenilen ince bir donmuş fare embriyo dokusu bölümünü taşıyan bir cam slaytla başlayın.
Kriyoseksiyonu kısaca çözün ve kriyo gömme ortamını çıkarmak için uygun etanol konsantrasyonuna daldırın. Çıkarma adımı, ortamın gevşemesini önlemeye yardımcı olur, aksi takdirde boyama sırasında doku görselleştirmesini etkileyebilir. Ek olarak, etanol dokuyu sabitleyerek doku morfolojisini ve bütünlüğünü korur.
Daha sonra, dokuya bir kresil menekşe solüsyonu pipetleyin. Pozitif yüklü, bazik bir boya olan kresil menekşe, kıkırdak dokusu matrisindeki proteoglikanlar gibi polianyonik kısımlara bağlanır. Oysa kemikler gibi mineralize dokularda, kemik matrisindeki fosfat grupları gibi negatif yüklü gruplarla reaksiyona girer.
Metakromatik bir boya olan kresil menekşe, dokunun farklı bölgelerini, bu bölgelerdeki farklı kimyasal bileşenlerle etkileşimine bağlı olarak doğal boyadan farklı renklerde lekeler.
Şimdi, fazla lekeyi çıkarmak için dokuyu uygun bir etanol konsantrasyonunda yıkayın. Dokudaki suyu değiştirmek ve dokuyu kurutmak için dokuyu artan etanol konsantrasyonlarına daldırın. Etanolün yerini almak için dokuyu ksile
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin