Doku Bölümlerinin Kresil Menekşe Boyaması: Donmuş Fare Embriyo Bölümlerinde Kıkırdak ve Kemikleri Görselleştirmek İçin Bir Boyama Prosedürü

0 görüntüleme3:32 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir doku bölümündeki kıkırdak ve kemik bölgelerini görselleştirmek için, ilgilenilen ince bir donmuş fare embriyo dokusu bölümünü taşıyan bir cam slaytla başlayın.

Kriyoseksiyonu kısaca çözün ve kriyo gömme ortamını çıkarmak için uygun etanol konsantrasyonuna daldırın. Çıkarma adımı, ortamın gevşemesini önlemeye yardımcı olur, aksi takdirde boyama sırasında doku görselleştirmesini etkileyebilir. Ek olarak, etanol dokuyu sabitleyerek doku morfolojisini ve bütünlüğünü korur.

Daha sonra, dokuya bir kresil menekşe solüsyonu pipetleyin. Pozitif yüklü, bazik bir boya olan kresil menekşe, kıkırdak dokusu matrisindeki proteoglikanlar gibi polianyonik kısımlara bağlanır. Oysa kemikler gibi mineralize dokularda, kemik matrisindeki fosfat grupları gibi negatif yüklü gruplarla reaksiyona girer.

Metakromatik bir boya olan kresil menekşe, dokunun farklı bölgelerini, bu bölgelerdeki farklı kimyasal bileşenlerle etkileşimine bağlı olarak doğal boyadan farklı renklerde lekeler.

Şimdi, fazla lekeyi çıkarmak için dokuyu uygun bir etanol konsantrasyonunda yıkayın. Dokudaki suyu değiştirmek ve dokuyu kurutmak için dokuyu artan etanol konsantrasyonlarına daldırın. Etanolün yerini almak için dokuyu ksilen ile yıkayın, dokuyu mikroskopi için şeffaf hale getirin.

Işık mikroskobu altında kıkırdak dokusu macenta görünürken kemik dokusu kahverengi görünür, bu da birbirlerinden ve çevre dokudan farklılaşmalarını kolaylaştırır.

Üç adet etiketli 50 mililitrelik santrifüj tüpü hazırlayın. Her tüpe 45 mililitre% 80 etanol ekleyin. Buzun üzerine üç tüp yerleştirin. 45 mililitre %95 etanol içeren bir tüp ve %100 etanol içeren bir tüpü buzun üzerine yerleştirin. Daha sonra, oda sıcaklığında 50 mililitrelik bir santrifüj tüpüne 45 mililitre ksilen ekleyin.

Bir PEN membran slaytını eldivenli bir elinize karşı yerleştirerek kısa bir süre çözün ve optimum kesme sıcaklığı bileşiğini çıkarmak için çalkalama ile% 80 etanol içeren tüplerin her birinde 30 saniye boyunca iki kez yıkayın. Ardından, slaytı bir alüminyum folyo tabakası üzerine yerleştirin. Slaytın üzerine %50 etanol içinde 0,8 mililitre %0,1 kresil menekşe pipetleyin ve 30 saniye boyayın.

Slaytı% 80 etanol içeren üçüncü tüpte 30 saniye boyunca yıkayın. Slaytı 30 saniye boyunca %95 etanol içeren tüpten, 30 saniye boyunca %100 etanol içeren tüpten ve son olarak 30 saniye boyunca ksilen içeren tüpten geçirerek kurutun. Bundan sonra, ksilenin boşalmasını sağlamak ve bölümlerin kurumasını sağlamak için slaytları 5 dakika boyunca hassas bir görev sileceğine yerleştirin.

10:26

Golgi-Cox Yöntemiyle Kalın Beyin Bölümler içinde Görüntüleme Nöronlar

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:29

Stereotaksik Atlas güdümlü lazer yakalama mikrodiseksiyon travma yaralanma tarafından etkilenen beyin bölgeleri

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:09

İntratümöral Heterojenite, Oncostreams ve Invasion'ın Mekansal ve Moleküler Karakterizasyonu için Glioma Alt Bölgelerinin Lazer Yakalama Mikrodizması

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:58

Embriyonik Farelerde damarları Etiketleme Bir Yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:41

Dondurularak Saklanmış Doku Kesiti Fiksasyonu ve Boyama: Lazer Mikrodiseksiyon için Donmuş Beyin Dokusu Kesitlerini İşleme Prosedürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:46

Fare Kraniyofasiyal Dokularının İmmün Boyanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:31

Hematopoetik Hücre Otomatik Ölçümü - undekalsifiye Kemik histolojik Görüntüler stromal hücre etkileşimleri

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:03

Fare Kraniyofacial dokularda ve Undecalcified kemik doku hazırlama ve Immünostasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:41

Mineralize Dokuları Incelemek için Konfeti Faresini Kullanarak Klonal Genetik İzleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:20

Gen Ekspresyonu Analizi için Fare Embriyonik Kıkırdağı ve Kemiğinin Lazer Yakalama Mikrodizmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026