JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:32 dk. • July 8th, 2025
Heterojen bir tümör hücresi popülasyonunda, bir anti-kanser ilacı ile tedavi çoğu hücreyi öldürür, ancak ilaca dirençli hücreler hayatta kalır ve bu da terapötik başarısızlıkla sonuçlanır.
İlaca dirençli hücrelerin oranını belirlemek için, çok kuyucuklu bir plakada heterojen bir tümör hücresi popülasyonunu tohumlayın. Hücre yapışmasını kolaylaştırmak için inkübe edin. Uygun bir antikanser ilaç çözeltisinin artan bir konsantrasyonunu ekleyin.
İlaç molekülleri ile etkileşim, hassas hücrelerin ölmesine ve ardından kültür plakalarından ayrılmasına neden olur. Buna karşılık, ilaca dirençli hücreler hayatta kalır ve plakaya bağlı kalır.
Ayrılan hücreleri çıkarmak için harcanan ortamı aspire edin. Taze ilaçsız ortam ekleyin ve plakayı fizyolojik koşullar altında inkübe edin. İlaca dirençli hücreler çoğalır ve tümör kolonileri oluşturur. Şimdi, kolonilere kristal viyole boyama çözeltisi ekleyin ve inkübe edin.
Mor renkli, zar geçirgen, pozitif yüklü bir leke olan kristal menekşe, hücrelere girer ve anyonik proteinleri ve DNA'yı bağlar, böylece hücrelere mor bir renk verir.
Ardından, reaksiyona girmemiş lekeyi çözündürmek için etanol ekleyin. Fazla lekeyi çıkarmak için yıkayın ve plakayı ha
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin