JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:37 dk. • July 8th, 2025
Drosophila larva oenositleri, cildin yüzeysel tabakası olan lateral epidermisin bazal yüzeyinde ayrı kümeler şeklinde bağlanan özel hücrelerdir. Bu oenositler öncelikle lipid metabolizmasında rol oynar.
Açlık sırasında, bu oenositler fazla lipid damlacıkları biriktirir. Her damlacık, bir fosfolipid tek tabakası ile çevrili, trigliseritler ve kolesterol esterleri gibi nötr lipitlerin hidrofobik bir çekirdeğinden oluşur.
Lipid damlacıklarını görselleştirmek için, bağlı oenositlerle Drosophila larva epidermisinin disseke edilmiş bir bölümünü alın. Proteazlar gibi hücresel proteinleri çapraz bağlamak ve oenositlerin yapısal bütünlüğünü korumak için paraformaldehit içeren bir sabitleme tamponu ile muamele edin. Sabitleme tamponunu çıkarın. Fotoağartmayı önlemek için karanlıkta floresan BODIPY bazlı bir boya ile inkübe edin.
İnkübasyon sırasında, polar olmayan boya, oenositlerin hücre zarı boyunca yayılır ve lipit damlacıklarını çevreleyen tek tabakayı geçer. Boya moleküllerinin hidrofobikliği, nötr lipitleri bağlamak için lipit damlacıklarının polar olmayan çekirdeğine hareketlerine izin verir.
Numuneyi, net görselleştirme için oenositler mikroskobik slayta dokunacak şekilde bir slayt ü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin