JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:40 dk. • July 8th, 2025
Beyin iskemisi sırasında, beyne giden kan akışının bozulması, dokuya oksijen ve besin tedarikini azaltarak beyin hasarına neden olur. Kısa iskemiden sonra, beyne giden kan akışı yeniden sağlandıkça, artan oksijen kaynağı ile reperfüzyon, reaktif iyon türlerinin aşırı üretimine neden olur ve iskemi-reperfüzyon hasarı olarak bilinen oksidatif doku hasarına yol açar.
Bir sıçan modelinde iskemi-reperfüzyon hasarını takiben beyin hasarını değerlendirmek için önce sıçan beynini hasat edin. Kalıntıları ve kanı temizlemek için soğutulmuş bir tamponda durulayın. İstenilen kalınlıkta koronal dilimler elde etmek için beyni bölümlere ayırın. Sonraki boyama için dilimleri, ön yüzeyleri yukarı bakacak şekilde tampon içeren bir tepsiye dikkatlice aktarın.
Beyin dilimlerinin üzerine suda çözünür bir redoks boyası olan ılık trifenil tetrazolyum klorür, TTC çözeltisi ekleyin. TTC ışığa duyarlı olduğu için karanlık koşullarda inkübe edin. TTC, doku bölümündeki hücrelere girer.
Canlı hücrelerde, kofaktörlerin varlığında aktif mitokondriyal süksinat dehidrojenaz enzimi, oksitlendiğinde renksiz olan TTC'yi suda çözünmeyen, kırmızı formazana indirgeyerek canlı hücreleri koyu kırmızıya boyar. Bununla birl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin