Sülfatlanmış Glikozaminoglikanların Gümüş Boyanması: Poliakrilamid Jellerde Sülfatlanmış Glikozaminoglikanların Görselleştirilmesi İçin Bir Boyama Yöntemi

Sülfatlanmış glikozaminoglikanlar, GAG'lar, farklı uzunluklarda bulunan, farklı pozisyonlarda sülfatlanmış tekrarlayan disakkarit birim zincirlerine sahip uzun, negatif yüklü, doğrusal polisakkaritlerdir.

Elektroforezi takiben bir poliakrilamid jelde zincir uzunluğu bakımından farklılık gösteren izole sülfatlanmış GAG'ları görselleştirmek için, jeli kasetinden dikkatlice çıkarın. Deiyonize su ile durulayın, lekelenmeye müdahale edebilecek bağlı jel parçalarını çıkarın.

Asidik bir Alcian mavisi çözeltisi ile tedavi edin. Asidik koşullar altında, merkezinde bir bakır atomu bulunan çok değerlikli bir katyonik boya olan Alcian mavisi, iyonik etkileşimler yoluyla negatif yüklü sülfatlanmış GAG'lerle spesifik olarak etkileşime girerek koyu mavi suda çözünmeyen bir kompleks oluşturur.

Jeli deiyonize su ve metanol ile yıkayın ve kalan lekeleri çıkarın. Jeli bir alkali gümüş nitrat çözeltisi ile inkübe edin. Alkali koşullar altında, Alcian mavisine bağlı sülfatlanmış GAG'lar, pozitif yüklü gümüş iyonlarının bağlanması ve kompleks oluşturması için alanlar sağlar.

Jeli, formaldehit ve sitrik asit içeren gelişmekte olan bir çözelti içinde muamele edin. Sitrik asit, formaldehitin optimum aktivi