Lignin için Maule Boyama: Arabidopsis Thaliana Kök Bölümlerinde Lignin Dağılımını Karakterize Etmek İçin Bir Teknik

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biyolojik Teknikler

0 görüntüleme • 2:44 dk • July 8th, 2025

Lignin, bitki hücre duvarında önemli bir yapısal bileşendir. Esas olarak siringil alkollerden veya S-lignin birimlerinden ve guaiasil alkollerden veya G-lignin birimlerinden ve H-lignin birimleri olarak adlandırılan küçük bir para-kumaril alkol popülasyonundan oluşan bir polimerdir.

S-lignin'in içeriği çeşitli ikincil bitki dokularında farklılık gösterir. Esas olarak ksiller damarlarda ve liflerde ve yapısal destek sağladığı liflerde ve interfasiküler liflerde bulunur.

S-lignin'in varlığını tespit etmek için, bir tüpte agaroza gömülü dikot sap kesitlerini alın. Gövde bölümlerine sırayla bir potasyum permanganat boyama çözeltisi, ardından seyreltilmiş hidroklorik asit ve son olarak zayıf bir baz olan amonyum hidroksit ile muamele edin.

Bu tedavi sırasında, hücre duvarında bulunan S-Lignin parçası, sonunda kırmızı görünen bir ürün oluşturmak için bir dizi değişikliğe uğrar.

Kırmızı renklenmenin yoğunluğu, daha koyu kırmızı görünen interfasiküler liflere kıyasla daha az S-lignin varlığına bağlı olarak ksilem hücrelerinde daha düşüktür. Bölümleri bir slayta aktarın ve ışık mikroskobu altında görselleştirin.

Kırmızı yoğunluğundaki değişim, odunlaşmış bitki dokularındaki S-lignin'in nispi oranının anlaşılmasına yardımcı olur.

Maule boyama için, gövde bölümlerini bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın. Bölümleri içeren tüpe 1 mililitre% 0.5 potasyum permanganat çözeltisi ekleyin. % 0.5 potasyum permanganat çözeltisini, tercihen, bölümleri rahatsız etmeden nazikçe yukarı ve aşağı pipetleyin.

2 dakikalık bir inkübasyondan ve pipetlemeyi tekrarladıktan sonra, mikrosantrifüj tüpünü tüm bölümler yerine oturana kadar bekletin. 1 mililitrelik bir pipet kullanarak 700 mikrolitre% 0.5 potasyum permanganat çözeltisi çıkarın. Potasyum permanganatı durulamak için 700 mikrolitre damıtılmış su ekleyin. Üç ila dört kez veya su çözeltisi berrak kalana kadar tekrarlayın.

Suyu attıktan sonra, koyu kahverengi renk bölümlerden boşalana kadar hızlı bir şekilde 1 mililitre% 3 hidroklorik asit ekleyin. Bu 3 ila 5 dakika içinde gerçekleşebilir veya her biri 5 dakikalık iki yıkama gerektirebilir. %3'lük hidroklorik asit çözeltisinin tamamını pipetleyin ve parlak alan aydınlatması altında görüntülemeden önce hemen 1 mililitre konsantre amonyum hidroksit çözeltisi ekleyin.

10:40

Lignification Dynamics ile tıklatın kimya tesislerinde görselleştirme: Çift etiketleme BLISS olduğunu!

İlgili videolar

0 Görüntüler

00:07

Floresan Problar ve Lignin Bitki Kesitlerinde Doğal Otofloresan Dayalı SFLIM Ile Etkileşimlerinin Ölçülmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:14

Bitki Dokularının Hücre Duvarındaki Arabinogalactan Protein ve Pektinlerin Floresan İmmünolokalizasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:04

Bitki Hücre Duvarları kapsamlı Kompozisyonel Analizi (Lignocellulosic biyokütle) Bölüm I: Lignin

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:35

Etiket- In situ Görüntüleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:30

Lignini Görselleştirmek için Wiesner Boyama: Arabidopsis thaliana'nın Gövdelerinde Bulunan Lignin Birikintilerini Boyama Tekniği

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:19

Kongo kırmızısı boyama: bitki gövdesi bölümlerindeki selüloz birikintilerini görselleştirmek için bir teknik

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:37

Calcofluor Beyaz Boyama: Dikot Bitki Gövdesi Bölümlerinin Hücre Duvarlarındaki Selüloz Birikintilerinin UV Kaynaklı Floresan Görselleştirmesi için Basit Bir Yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

14:43

Lignin Aşağı düzenleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:39

Histokimyasal boyama

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 29 Ağustos 2026