JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 2:19 dk. • July 8th, 2025
Selüloz, β-1→4 bağı ile bağlanmış ve moleküller arası hidrojen bağları yoluyla paralel olarak düzenlenmiş β-glikoz birimlerinin dallanmamış bir polimeridir.
Selüloz, bitki hücre duvarının ana yapısal bileşeni olarak hizmet eder, hücrelere şekil ve sertlik sağlar ve bitki büyümesini ve gelişmesini kolaylaştırır. Hücre duvarı içindeki selüloz oranı, hücre tipine ve büyüme aşamasına göre bitki genelinde önemli ölçüde değişir.
Gövdedeki selüloz birikimini görselleştirmek için, agaroza gömülü gövde bölümlerinin ince kesitlerini alın.
Kongo kırmızı floresan boyası ekleyin ve bölümleri inkübe edin.
Kongo kırmızısı molekülleri hücre duvarına girer ve selülozun hidroksil grupları ile hidrojen bağları oluşturur, böylece polimer üzerine adsorbe edilir. Bu, epidermise, kortekse ve öze kırmızı bir renk verir.
Boya molekülleri ayrıca ksilem ve interfasiküler liflerin karmaşık hücre duvarları içinde yayılır ve sert lignin bariyerini geçer, böylece bu dokulara da kırmızı bir renk verir.
Şimdi, fazla lekeyi çıkarmak için bölümleri suyla durulayın. Bölümleri bir mikroskop lamına aktarın ve bir lamel yerleştirin.
Floresan mikroskobu altında görüntülendiğinde, epidermis, korteks, merkezi öz, ksilem ve interfasiküler lifler, selüloz içeriğine karşılık gelen kırmızı görünür.
Kongo Kırmızısı boyama için, gövde bölümlerini bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın ve 1 mililitre% 0.5 Kongo Kırmızısı çözeltisi ekleyin. %0,5'lik Kongo Kırmızısı solüsyonunu, bölümleri metin protokolünde açıklandığı gibi inkübe etmeden ve yıkamadan önce, bölümleri rahatsız etmeden yukarı ve aşağı nazikçe pipetleyin. Bölümleri kesilmiş bir pipet ucuna ve bir mikroskop lamına nazikçe pipetleyin, ardından üzerlerini bir lamel ile örtün. 560 nanometre emisyon filtresi kullanarak mavi ışık uyarımı altında mikroskop lamındaki örnekleri gözlemleyin.