Calcofluor Beyaz Boyama: Dikot Bitki Gövdesi Bölümlerinin Hücre Duvarlarındaki Selüloz Birikintilerinin UV Kaynaklı Floresan Görselleştirmesi için Basit Bir Yöntem

Bitki hücrelerinde, özel bir koruyucu tabaka olan hücre duvarı, plazma zarını çevreler. Hücre duvarı ağırlıklı olarak, β-1, 4 glikozidik bağlarla uçtan uca bağlanmış glikoz monomerlerinin doğrusal, dallanmamış bir polisakkariti olan selülozdan oluşur.

Selüloz, bir hemiselüloz, pektin ve protein matrisine gömülü, ortogonal olarak düzenlenmiş selüloz mikrofibrilleri şeklinde toplanmış bir halde bulunur.

Vasküler ksilem dokusu ve interfasiküler lifler gibi bazı hücreler, hücre duvarlarında sertleştirici bir ajan olan lignin de içerir.

Bitki hücre duvarlarında selüloz birikimini görselleştirmek için, tamponda bir dikot bitki sapının agaroza gömülü enine kesitleri ile başlayın. Sulu bir kemifloresan, düzlemsel boya olan calcofluor white çözeltisi ekleyin. Boyanın dokuya yayılmasına izin vermek için inkübe edin.

İçeri girdikten sonra, kalkoflor beyazı, hidroksil fonksiyonel grupları aracılığıyla, selülozdaki glikoz monomerlerinin hidroksil grupları ile etkileşime girer ve hidrojen bağları oluşturur. Bu, boyayı selüloza yaklaştırır ve ek van der Waals etkileşimlerini destekleyerek stabil boya-selüloz kompleksine yol açar.

Gövde kısımlarını bir cam kızak üzerine aktarın ve bir lamel monte