Calcofluor Beyaz Boyama: Dikot Bitki Gövdesi Bölümlerinin Hücre Duvarlarındaki Selüloz Birikintilerinin UV Kaynaklı Floresan Görselleştirmesi için Basit Bir Yöntem

0 görüntüleme2:37 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bitki hücrelerinde, özel bir koruyucu tabaka olan hücre duvarı, plazma zarını çevreler. Hücre duvarı ağırlıklı olarak, β-1, 4 glikozidik bağlarla uçtan uca bağlanmış glikoz monomerlerinin doğrusal, dallanmamış bir polisakkariti olan selülozdan oluşur.

Selüloz, bir hemiselüloz, pektin ve protein matrisine gömülü, ortogonal olarak düzenlenmiş selüloz mikrofibrilleri şeklinde toplanmış bir halde bulunur.

Vasküler ksilem dokusu ve interfasiküler lifler gibi bazı hücreler, hücre duvarlarında sertleştirici bir ajan olan lignin de içerir.

Bitki hücre duvarlarında selüloz birikimini görselleştirmek için, tamponda bir dikot bitki sapının agaroza gömülü enine kesitleri ile başlayın. Sulu bir kemifloresan, düzlemsel boya olan calcofluor white çözeltisi ekleyin. Boyanın dokuya yayılmasına izin vermek için inkübe edin.

İçeri girdikten sonra, kalkoflor beyazı, hidroksil fonksiyonel grupları aracılığıyla, selülozdaki glikoz monomerlerinin hidroksil grupları ile etkileşime girer ve hidrojen bağları oluşturur. Bu, boyayı selüloza yaklaştırır ve ek van der Waals etkileşimlerini destekleyerek stabil boya-selüloz kompleksine yol açar.

Gövde kısımlarını bir cam kızak üzerine aktarın ve bir lamel monte edin. Ultraviyole ışık aydınlatması altında, selüloza bağlı boya molekülleri parlak beyaz renkte floresan renk verir.

Epidermis, korteks ve öz hücreleri, yüksek selüloz içeriği nedeniyle açıkça ayrılmış hücre duvarı ana hatları ile yoğun floresan sergiler. Karşılaştırıldığında, ksilem ve interfasiküler liflerin hücreleri loş bir şekilde floresan olur, bu da muhtemelen lignin varlığına bağlı olarak yetersiz boya difüzyonunu düşündürür.

Kalkoflor beyazı boyama için, gövde bölümlerini bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın ve %0.02'lik kalkoflor beyazı çözeltisinden bir mililitre ekleyin. Solüsyonu nazikçe yukarı ve aşağı pipetleyin. İnkübe etmeye devam edin ve bölümleri UV ışığı altında gözlemlemeden önce metin protokolünde ayrıntılı olarak belirtildiği gibi yıkayın.

09:27

Kristalin Selüloz Birikimin Yüksek Çözünürlüklü Niceleme Arabidopsis Kökler Doku spesifik Hücre Duvarı Değişiklikler Monitör

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:44

Filamentöz Mantarların Canlı Hücre Görüntülemesi İçin Membran ve Hücre Duvarı Seçici Floresan Boyaların Uygulanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:14

Bitki Dokularının Hücre Duvarındaki Arabinogalactan Protein ve Pektinlerin Floresan İmmünolokalizasyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:19

Kongo kırmızısı boyama: bitki gövdesi bölümlerindeki selüloz birikintilerini görselleştirmek için bir teknik

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:39

Histokimyasal boyama Arabidopsis thaliana Ortaöğretim Hücre Duvar Elemanları

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:05

Apple Pulp'da Sitoplazmik Ca2+'yı Fluo-4/AM ile Boyama

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:55

Floresan Görüntüleme için Bitki Dokularının Optik Temizlenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:48

Mikoheterotrofik Bitki Dokularında Mantar Kolonizasyonunu Yorumlamak ve Tohumların Simbiyotik Çimlenmesi için Mikroskopi Teknikleri

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:21

Clearing Teknolojisi ile Pirinç Sürgünlerinde Derin Floresan Gözlemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:14

Moss Physcomitrium patens'te Calcofluor Kullanarak Hücre Duvarı Dinamiğinin 3-D Hızlandırılmış Görüntülenmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026