Mikolik Asit Varyantlarının İnce Tabaka Kromatografisi Tabanlı Ayrımı: Mikobakteriyel Hücre Duvarı Lipidlerini Polariteye Göre Ayırmak İçin Bir Yöntem

Mikobakteriyel hücre duvarı, mikolik asitlerin farklı varyantlarını içerir - korunmuş alfa zincirlerine sahip uzun zincirli yağ asitleri. Beta zincirlerinde yapısal farklılıklar vardır ve bu da farklı mikolik asitlerin polaritesindeki değişikliklere neden olur.

Varyantları ince tabaka kromatografisi veya bir sıvı kromatografi tekniği olan TLC kullanarak ayırmak için, istenen organik çözücü içinde mikobakteriyel hücre duvarı lipitlerini alın. Lipitleri, sabit faz olarak işlev gören ince bir adsorban malzeme tabakası ile önceden kaplanmış bir TLC plakasının tabanına yakın bir yerde tespit edin.

Plakayı, mikolik asitlerin erken difüzyonunu önlemek için sıvı seviyesinin numune noktalarının altında olduğundan emin olarak organik bir çözücü - mobil faz - içeren bir kavanozun içine yerleştirin.

Çalışma sırasında, mobil faz, kılcal hareket yoluyla plaka üzerindeki adsorban tabakanın küçük gözeneklerinden yükselir. Sonunda, mikolik asitler çözücü içinde çözünür ve yukarı doğru hareket eder.

Daha polar mikolik asit varyantları, moleküller arası kuvvetler yoluyla polar durağan faz tarafından geçici olarak adsorbe edilir ve yukarı doğru hareketlerini engeller. Daha az polar mikolik asitler pol