Hidrofilik Etkileşim Sıvı Kromatografisi: Hidrofilik Polar Analitleri Hidrofilik Boncuklar Kullanarak Ayırmak İçin Bir Teknik

Hidrofilik etkileşim sıvı kromatografisi, HILIC, hidrofilik polar bileşikleri polarite derecelerine göre ayırmak için kullanılan bir tekniktir. Polar fonksiyonel grupları taşıyan hidrofilik boncuklarla dolu bir HILIC sütunu kurarak başlayın.

İlk olarak, kolonu bir dengeleme tamponu ve mobil faz - organik çözücü ve su karışımı kullanarak şartlandırın. Tampon molekülleri pH'ı stabilize ederken, organik çözücü kolonu doyurur. Su molekülleri hareketsiz hale gelir ve hidrofilik boncuklar üzerinde sulu bir tabaka oluşturur.

Bir floresan etiketi ile etiketlenmiş bir glikan karışımı - hidrofilik polar bileşikler - içeren numuneyi yükleyin. Numuneyi, optimum akış hızında kolon boyunca bir mobil faz gradyanı kullanarak çalıştırın.

Numune hidrofobik mobil faz boyunca hareket ettikçe, glikanlar sulu tabakaya göç eder ve safsızlıkları geride bırakır. Daha sonra, glikanlar boncuklar üzerindeki polar fonksiyonel gruplara doğru hareket eder. Burada, daha fazla polar glikan güçlü bir şekilde bağlanırken, daha az polar olanlar gevşek bir şekilde bağlanır.

Mobil faz hidrofobikliği azaldıkça, daha az polariteye ve daha kısa alıkonma süresine sahip zayıf bağlı glikanlar önce elüte olur. Tersine, daha y