Bütil Bağımlı Hidrofobik Etkileşim Sıvı Kromatografisi: Hidrofobik Etkileşimlere Dayalı Antikor-İlaç Konjugatlarını Karakterize Etmek İçin Bir Teknik

Antikor-ilaç konjugatları - ADC'ler - hedefe özgü bir monoklonal antikorun uygun bağlayıcılar aracılığıyla sitotoksik ilaçlarla bağlanmasıyla oluşturulur. Stokastik konjugasyon işlemi, farklı sayıda ilaç parçasına sahip ADC'ler oluşturur.

ADC türleri, terapötik etkinliklerini belirleyen ilaç-antikor oranları veya DAR ile karakterize edilir. ADC'lerin hidrofobikliği, onları hidrofobik etkileşim, sıvı kromatografisi veya HIC bazlı karakterizasyon için uygun adaylar haline getirir.

Başlamak için, agaroz matris bazlı sabit faz içeren bir kromatografi kolonunu monte edin. Matris, hidrofobik alkil fonksiyonel grupları olan butil kısımlarına çapraz bağlıdır. Sütunu yüksek tuz bağlama tamponu ile dengeleyin. ADC çözeltisini sütuna yükleyerek takip edin.

Tampondaki tuz iyonları, ADC'lerin etrafındaki su moleküllerinin yerini alarak hidrofobik bölgelerini açığa çıkarır. Bu, ADC'lerin hidrofobik etkileşimler yoluyla bütil ligandlarına bağlanmasını sağlar. Daha fazla sayıda bağlı ilaç parçasına sahip ADC'ler, kolon ile daha güçlü etkileşim gösterir.

Yüksek tuz tamponunu, düşük tuz konsantrasyonuna sahip elüsyon tamponu ile yavaşça değiştirin. Tuz konsantrasyonunu kademeli olarak azaltma işlemi