Headspace Gaz Kromatografisi: Zebra Balığı Embriyolarında Etanol Konsantrasyonunu Değerlendirme Tekniği

Uçucu bir organik bileşik olan etanolün konsantrasyonunu analiz etmek için, homojenize etanol ile muamele edilmiş zebra balığı embriyo kültürü süpernatantını bir kromatografi şişesinde alarak başlayın. Süpernatant, etanole ek olarak diğer uçucu olmayan organik bileşikleri içerir. Kapalı şişeyi kromatografi düzeneğinin bir örnekleyici ünitesine yerleştirin ve uygun bir sıcaklıkta ısıtın.

Isıtma sırasında, etanol buharlaşır ve uçucu olmayan kalıntıları geride bırakarak gaz fazına veya üst boşluğa geçer. Bu, örnekleyicinin gaz halindeki etanolü sürekli bir taşıyıcı gaz akışına sokmasına izin verir. Bu bir mobil faz görevi görür.

Etanol, sıvı sabit fazın paketlenmiş bir yatağını içeren önceden ısıtılmış sarmal kromatografi kolonundan geçer. Uçuculukları ve polariteleri nedeniyle, hareket eden etanol molekülleri, kendilerini sabit faza bölerek sabit faz parçacıkları üzerinde adsorbe olmaya başlar.

Yüksek kolon sıcaklığı nedeniyle, etanol moleküllerinin adsorpsiyonu kararsız ve geçicidir, bu da bu moleküllerin taşıyıcı gaz akışı boyunca kademeli olarak desorbe olmasına ve göç etmesine izin verir. Bu etanol molekülleri, kolon uzunluğu boyunca bir dizi adsorpsiyon-desorpsiyon olayına uğrar