JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:15 dk. • July 8th, 2025
Heparan sülfatlar, HS'ler gibi sülfatlanmış glikozaminoglikanlar, hücre yüzey proteinlerine bağlı, değişken zincir uzunluklarına sahip, negatif yüklü, doğrusal, sülfatlanmış polisakkaritlerdir.
Fare akciğer dokusundan izole edilen farklı uzunluktaki HS'leri tahmin etmek için jel kaset montajı ile başlayın. Kısmen, katalizör maddeler - amonyum persülfat ve tetra-metil-etilen-diamin dahil olmak üzere yüksek konsantrasyonlu akrilamid-bisakrilamid çözeltisi ile doldurun. Polimerizasyonu engelleyebilecek hava temasını önlemek için su ile kaplayın. Kuluçkaya yatmak.
Katalizör ajanlar, küçük gözenekli çözünen jel oluşturan akrilamid-bisakrilamid polimerizasyonunu indükler. Suyu atın. Katalizör ajanlarla düşük konsantrasyonda akrilamid-bisakrilamid çözeltisi ekleyin. Kuyucuklar oluşturmak için bir jel tarak yerleştirin. Çözelti polimerize olur ve geniş gözenekli istifleme jeli oluşturur.
Elektroforez sırasında optimum elektrik iletkenliği için elektroforez tankının odalarını çalışan tampon ile doldurun.
HS karışımını, izleme boyası ve sükroz içeren yükleme tamponunda çözün. Daha sonra, bu karışımı ve standart HS merdivenlerini kaset kuyularına aktarın. Sükroz karışımı kuyucuklarla sınırlar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin